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TCS SP8 DLS共聚焦顯微鏡

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更新時間:2022-11-01 15:34:59瀏覽次數(shù):250次

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產(chǎn)品簡介

將兩種專用成像系統(tǒng)的優(yōu)勢合二為一:使用 Leica TCS SP8 DLS (數(shù)字光片),您可在顯微鏡上使用柔和的單平面照明實現(xiàn)的共聚焦。通過研制出 TwinFlect 反光鏡,我們就能將共聚焦平臺 Leica TCS SP8 變?yōu)楹唵我子玫亩喙δ芄馄@微鏡。

詳細介紹

徠卡TCS SP8 DLS 結(jié)合光片與共聚焦技術(shù) Leica TCS SP8 DLS


將兩種專用成像系統(tǒng)的優(yōu)勢合二為一:使用 Leica TCS SP8 DLS (數(shù)字光片),您可在顯微鏡上使用柔和的單平面照明實現(xiàn)的共聚焦。通過研制出 TwinFlect 反光鏡,我們就能將共聚焦平臺 Leica TCS SP8 變?yōu)楹唵我子玫亩喙δ芄馄@微鏡。

我們轉(zhuǎn)向采用光片垂直布置設(shè)計。

黑腹果蠅眼睛綠色熒光蛋白表征 (3P3 催化劑) 的顏色編碼三維圖集。樣品來源:Nadja Dinges,Roignant Lab,IMB Mainz。


擴展選件


● 通過單平面照明增強細胞活性

● 使用 sCMOS 攝像頭觀察快速實時過程

● 樣品處理簡單,可進行多位置實驗

● 將共聚焦模式與光片顯微鏡技術(shù)相結(jié)合,拓展新應(yīng)用領(lǐng)域

● 兩側(cè)同時照明,消除昏暗區(qū)域

● Leica TCS SP8 全系列始終能針對您的應(yīng)用找到理想成像方法

● 將共聚焦平臺變?yōu)楣馄@微鏡。隨時從 Leica TCS SP8 升級為 Leica TCS SP8 DLS

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光片垂直布置—如何將光片技術(shù)引入共聚焦平臺?

光片顯微鏡通常需要在獨立系統(tǒng)中安裝專用的光學(xué)裝置,其中照明和檢測物鏡相互垂直布置。Leica TCS SP8 DLS 讓光片顯微鏡變得非常的簡便。的 TwinFlect 反光鏡裝置使照明光片偏轉(zhuǎn) 90 度,從而將照明和檢測光路集成到每臺倒置 Leica TCS SP8 的縱向軸中,同時又不犧牲共聚焦功能。


執(zhí)行和記錄長期觀察

成像需要光照,但光照過強會損傷細胞。光片顯微鏡是當今柔和的成像方案,它可減少光毒性和光漂白造成的總體光損傷。這會自動降低樣品活性。在發(fā)育生物學(xué)中,柔和光片成像尤其有幫助:其光照強度低,攝取快速,以便長期觀察果蠅胚胎等敏感性發(fā)育生物體,并以實時三維方式了解組織和器官的形成過程。


Low phototoxicity and specimen imaging in 3D: Development of Drosophila melanogaster over six hours. Probe: Light-sensitive RFP. 3D rendering. 150 µm z stack, 30sec/stack.


光片成像原理

光片顯微鏡對樣品進行單平面照明,非常適合敏感樣品和快速生物過程的成像。由于不存在離焦激發(fā),可將光毒性的影響局限于焦平面上。這表示您還可自動獲得光學(xué)切片,并在光片下移動樣品,從而實現(xiàn)樣品 3D 成像。




多色長期觀察


斑馬魚體側(cè)線 17 小時發(fā)育過程。樣品來源:Darren Gilmour,EMBL Heidelberg (斑馬魚 36hpf,CldnB:lynGFP/CXCR4B:nucTomato)

高速成像:斑馬魚跳動的心臟,轉(zhuǎn)基因株系 flik1::EGFP。在 xytz 錄制之后進行后期攝取對齊。錄制速度:120 幀/秒。來源:Emily Steed,Vermot Lab,IGBMC Strasbourg,F(xiàn)rance。


以的分辨率快速攝取圖像


您是否需要以三維方式長期觀察快速周期性生物過程?DLS 模塊就是您的。發(fā)現(xiàn)斑馬魚心臟的律動之美。

使用 Leica TCS SP8 DLS,您可在兩個的 sCMOS 攝像頭之間任意選擇,以出色的分辨率和高達 120 幀/秒的幀頻進行快速圖像攝?。簆co.edge sCMOS 攝像頭和 Hamamatsu 推出的 ORCA-flash 4.0 V2 攝像頭均已集成在 LAS X LightSheet Wizard 中。



追蹤快速的周期性運動

LAS X軟件里新的 xytz 掃描模式可實現(xiàn)平面時間序列成像,并制成4D電影格式播放。該功能使得研究者可以追蹤那些無法在傳統(tǒng)Z軸堆積延時攝影模式下捕捉到的快速運動-比如斑馬魚心臟的跳動。



眾多其他應(yīng)用優(yōu)勢

我們的光片模塊不僅僅作為共聚焦顯微鏡的功能性插件。Leica TCS SP8 和數(shù)字光片相輔相成,使您可隨意擴展選件。您可在 LAS X 軟件中方便地切換共聚焦和光片模式,使用共聚焦技術(shù)輕松操控樣品。光轉(zhuǎn)換或致傷實驗?zāi)酥梁罄m(xù)的柔和長期觀察將變得十分簡便。

組合成像模式:在 Kaede 斑馬魚尾巴上的光轉(zhuǎn)換 (405 nm 激光) 和致傷 (多光子激光) 實驗。移向傷口 (大片紅色區(qū)域) 的光轉(zhuǎn)換細胞 (小紅點) 的延時錄制。


被巨噬細胞愈合的傷口

4 日齡斑馬魚胚胎受傷后尾巴中的巨噬細胞 (mpeg1:Kaede)。樣品來源:Francesca Peri,EMBL Heidelberg。

始終選用正確的激光

Leica TCS SP8 共聚焦顯微鏡的所有可見激光都可用于光片成像。白光激光在光片實驗中提供較大的靈活性,以便選擇正確的染料。在多色實驗中,甚至可使用光譜相近的熒光基團。


熟悉的樣品制備流程

Leica TCS SP8 DLS 采用垂直實驗配置,樣品制備流程與您原先熟悉的流程相近。樣品封裝在傳統(tǒng)的玻璃底 Petri 培養(yǎng)皿中,可直接操作。您甚至還可在多個實驗位置篩選多個樣品:利用共聚焦載物臺自動化技術(shù)在同一實驗配置下實現(xiàn)多樣品成像。的前提條件是:在樣品兩側(cè)需要留出放置 TwinFlect 反光鏡的空間。

Leica TCS SP8 DLS 的樣品制備。樣品包裹在玻璃底 Petri 培養(yǎng)皿的瓊脂中。必須將多余的瓊脂清除干凈,以便為 TwinFlect 反光鏡留出空間。


面向工作流的軟件設(shè)計

LAS X 顯微鏡軟件可逐步指導(dǎo)用戶完成數(shù)據(jù)記錄和評估。面向工作流的設(shè)計可幫助用戶高效使用儀器。校準程序十分便捷,可精確創(chuàng)建光片。

樣品兩側(cè)照明設(shè)計:兩塊 TwinFlect 反光鏡相對放置,使它們均可被掃描器瞄準,從而消除昏暗區(qū)域。要在較大視場下獲得清晰圖像,可通過 LAS X 軟件的 LightSheet Wizard 在線或離線融合選件將兩幅圖像融合在一起。

LAS X 軟件還有許多附加軟件包,您可根據(jù)自己的需求進行定制。LAS X 三維可視化模塊可實現(xiàn)直觀剪輯、快速渲染和立體顯示,以新穎的方式交互處理三維數(shù)據(jù)?!捌促N圖"實驗可幫助您觀察大片區(qū)域,而“標記和查找"實驗可在多位置設(shè)置下觀察多個相關(guān)區(qū)域。


優(yōu)質(zhì)的光學(xué)器件

適合各類應(yīng)用的優(yōu)質(zhì)物鏡是徠卡公司的標志之一。垂直布置光片系統(tǒng)的核心由物鏡和 TwinFlect 反光鏡裝置構(gòu)成。您可根據(jù)您的實驗要求在兩種照明物鏡間任意選擇 - Leica HC PL Fluotar 2.5x/0.07 和 Leica HCX PL FLUOTAR 5x/0.15,以此創(chuàng)建所需的光片。要展現(xiàn)最微小的細節(jié)或獲取更大的視場,您可選擇我們的檢測物鏡:Leica HC FLUOTAR L 25x/0.95 W 或 Leica HC APO L 10x/0.3 W 水浸物鏡。


便捷的數(shù)據(jù)處理

長期 3D 觀察過程會產(chǎn)生大量數(shù)據(jù)。LAS X 軟件中集成了多種工具,可方便地管理這些數(shù)據(jù)。使用在線融合工具,您可選擇保留原始數(shù)據(jù),或僅保留融合圖像以節(jié)省磁盤空間。攝取時將自動保存數(shù)據(jù),而借助智能加載功能可方便地查看數(shù)據(jù),直接訪問大延時數(shù)據(jù)集中的特定時間點或相關(guān) Z 軸堆棧。您可在管線中編譯所需的后期處理步驟,它們將自動處理。



軟件控制的氣候室

軟件控制的氣候室可保持宜樣品的環(huán)境條件。用戶可使用 LAS X 環(huán)境控制模塊實現(xiàn)對實驗條件的全面控制。在實驗過程中,可監(jiān)控所記錄的環(huán)境數(shù)據(jù)。您可在同一個界面設(shè)置所有環(huán)境條件,并運行溫度曲線,例如,熱沖擊實驗的溫度曲線。




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