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COPAS Infinity 流式細(xì)胞儀

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更新時間:2023-06-08 18:04:33瀏覽次數(shù):164次

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COPAS Infinity 流式細(xì)胞儀

詳細(xì)介紹

模式生物由于其結(jié)構(gòu)簡單、生活周期短、培養(yǎng)簡單、基因組小等特點,在生物醫(yī)學(xué)等域發(fā)揮重要作用。模式生物作為材料不僅能回答生命科學(xué)研究中基本的生物學(xué)問題,對人類一些疾病的病理解析和治療也有重大的借鑒意義。


在許多模式生物研究中,研究人員需要對各種小型模式生物,如秀麗線蟲、斑馬魚幼魚、果蠅、擬南芥等進(jìn)行觀察和分選。對于傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀來說,小型模式生物粒徑過大且很脆弱,很容易在實驗過程中破碎或死亡,而鏡下手動分選繁瑣且枯燥,分選充滿主觀因素,因而限制了實驗的規(guī)模和準(zhǔn)確率。為了這一空白,在1998年,COPAS 系統(tǒng)(大粒徑復(fù)雜顆粒物參數(shù)分析和分選儀)應(yīng)運而生。



型號:COPAS Infinity


COPAS系統(tǒng)是 Union Biometrica 公司基于傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀原理設(shè)計發(fā)明的一款用于大粒徑顆粒物全自動高通量分析分選平臺,先應(yīng)用于秀麗線蟲高通量藥物篩選,COPAS 系統(tǒng)又被人稱作“線蟲篩選器”。其通過自動化代替了耗時的手工分選過程,大大減少了實驗所需的時間,消除人為誤差,實現(xiàn)了以無法想象的高通量藥物篩選。


COPAS Infinity 與初的 COPAS 流式細(xì)胞平臺一樣,提供了對活的多細(xì)胞生物、細(xì)胞簇、單細(xì)胞、種子和無機(jī)顆粒等對于傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀來說太大或太脆弱樣品的自動化高通量分析和分選。此外,COPAS Infinity 在更小的尺寸范圍內(nèi)大大提高了檢測靈敏度,并增加了參數(shù)檢測數(shù)量,搭配 Profiler 高軟件可對樣品進(jìn)行細(xì)致分析。


研究多細(xì)胞結(jié)構(gòu)的實驗人員都知道,細(xì)胞形成群體結(jié)構(gòu)之后,其信息交互和行為會與單細(xì)胞時明顯不同。COPAS Infinity 大粒徑模式生物流式分選平臺系統(tǒng)儀允許實驗人員對組織、腫瘤或器官中的細(xì)胞與細(xì)胞之間的相互作用進(jìn)行研究,而不需要用傳統(tǒng)的方法破壞其整體結(jié)構(gòu)。而針對模型生物,COPAS Infinity 可以代替手工分揀,提供快速、靈敏、溫和、重復(fù)性高的全自動化、高通量分析和分選功能。


利性技術(shù)原理
基于傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀原理,樣品在壓力的作用下從連續(xù)攪拌的樣品杯進(jìn)入流動室(FlowCell),在鞘液的包裹下形成一條狹窄的液流進(jìn)入流動室中心,通過激光束的檢測。系統(tǒng)根據(jù)激光束檢測結(jié)果控制樣品的去留,默認(rèn)狀態(tài)下,樣品被溫和的氣流引導(dǎo)至“回收容器”中,當(dāng)系統(tǒng)接收到分選信號時,空氣分選器短暫關(guān)閉,含待分選樣品的液滴,即可直接流入對應(yīng)容器中完成分選。


與傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀相比,大粒徑流式分選平臺在幾個重要的設(shè)計上有所不同:
(1)大粒徑流動室可以容納 2-1500μm 樣本,比傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀要大得多,使其能夠完成大粒徑生物樣本的高通量分選,包括但不限于秀麗線蟲、果蠅、蠶卵、斑馬魚、擬南芥、干細(xì)胞、胰島、花粉等;
(2)較慢的液流流速和較低的運行壓力,樣品分選過程中液流剪切力小,避免了高剪切力對生物樣本的損害,保證模式生物和多細(xì)胞樣本的生物活性;
(3)利氣壓分選技術(shù),利用溫和氣流將生物樣本以液滴的形式進(jìn)行分選,相比較傳統(tǒng)流式技術(shù)采用機(jī)械力或靜電電荷力進(jìn)行分選,避免了生物樣品的破碎即失活。    




控制和分析軟件
FlowPilot 軟件為大粒徑流式分選平臺設(shè)計,平臺集成功能強(qiáng)大的硬件和用戶友好的軟件控制,能夠直觀地呈現(xiàn)各樣品參數(shù),并通過多種不同的分選模式對各樣品逐一分選,獲得目標(biāo)樣品及量化的樣品參數(shù)數(shù)據(jù),方便、快捷且結(jié)果有據(jù)可循,特別適合于各種高通量微模式生物研究及大規(guī)模藥物篩選等域。





可使用 FlowPilot 控制軟件進(jìn)行如下操作:
(1)根據(jù)個人喜好輕松地進(jìn)行儀器控制、數(shù)據(jù)采集和分配選項面板的訪問或隱藏;
(2)自定義和操作多個獨立的統(tǒng)計圖像(各參數(shù)直方圖、X-Y關(guān)系圖等),包括每個區(qū)域的自定義縮放和邏輯門控選項;
(3)檢索實驗文件、樣本模板和數(shù)據(jù)分析文件(在線或離線),為采集后再分析提供了強(qiáng)大的工具支持;

(4)創(chuàng)建自定義的分選輸出模板,用于對于多孔板中每個孔的分配信息進(jìn)行設(shè)定;
(5)以標(biāo)準(zhǔn)的流式細(xì)胞儀格式存儲數(shù)據(jù),以便以后使用實驗室中其他傳統(tǒng)的流式細(xì)胞儀軟件進(jìn)行分析等。


Profiler/FlowPilot ProTM 軟件
Profiler/FlowPilot Pro 高功能是在 FlowPilot 軟件基礎(chǔ)上,進(jìn)一步對樣品個體光密度(EXT)和熒光參數(shù)(Red、Green、Yellow)的徑向分布進(jìn)行掃描,獲得 Profiler 圖像,根據(jù) Profiler 圖形可對生物樣品進(jìn)行進(jìn)一步處理和分析。


Profiler 可以沿樣本軸向長度(TOF)進(jìn)行多達(dá)8000個光學(xué)數(shù)據(jù)采樣,將數(shù)據(jù)采集從整體水平提升到器官和多細(xì)胞的水平。隨后,軟件以圖形和數(shù)字的形式呈現(xiàn)這些信號沿物體長度方向上的變化,向?qū)嶒炄藛T顯示每個樣品在多個“光學(xué)剖面”上所有光學(xué)參數(shù)的地形圖及強(qiáng)度變化,以峰高、峰寬、峰數(shù)和相對位置的形式進(jìn)行表現(xiàn)——所有參數(shù)都可作為后續(xù)的分選條件。




Partial Profiling
Profiler 的另一個分析特性是“Partial Profiling”部分剖析,在樣本上選定一個區(qū)域,“Partial Profiling”會顯示出該區(qū)域詳細(xì)光學(xué)或熒光特性(峰高、峰寬及數(shù)量等),以生成用戶自定義分選參數(shù),“Partial Profiling”可以用于分析樣品部分區(qū)域的光學(xué)特性。


COPAS Infiniy 標(biāo)配利性 FlowPilot-Pro 軟件平臺,集成功能強(qiáng)大的硬件和直觀的用戶控制,提高了光學(xué)靈敏度、流體力學(xué)參數(shù)調(diào)節(jié)和定量分選性能,為科研人員的實驗室提供了更高別的分析分選功能和用戶體驗,特別是在高通量篩選上系統(tǒng)性能更加、靈活性和易用性更加強(qiáng)大。




特點及優(yōu)勢
適用范圍廣

直徑 2-1500μm 樣品,從無機(jī)細(xì)顆粒物到斑馬魚均適用;
多種 COPAS Infinity 產(chǎn)品型號可供選擇,每種規(guī)格產(chǎn)品適用于某一特定粒徑范圍樣品使用
PMT和激光器可選,可用于各種熒光標(biāo)記物研究;
分選模式多樣化,清晰辨別樣本差異;


數(shù)據(jù)客觀
量化生物顆粒徑向長度(TOF)、光密度(EXT)和熒光參數(shù),快速分析顆粒性質(zhì);
自定義參量范圍,系統(tǒng)根據(jù)設(shè)定值自動篩選;
具有熒光補(bǔ)償功能,測量參數(shù)更準(zhǔn)確;
系統(tǒng)自動檢測、計算、比對生物微粒各項參數(shù),完成篩選過程,排除人為因素干擾;
標(biāo)配 Profiler 軟件可對單微粒光密度、熒光參數(shù)的徑向分布做進(jìn)一步細(xì)致分析。


全自動,準(zhǔn)確高效
大分選速率可達(dá)20萬/小時,節(jié)約大量人工成本;
系統(tǒng)按照程序,自動將生物微粒分配到96孔板或其他孔板中;
系統(tǒng)對每一個生物微粒逐個分析、分選,重現(xiàn)性更好;
適合大規(guī)模篩選,是目上應(yīng)用成功的微模式生物分選系統(tǒng)。


生物活性保持
分選過程始終保持無菌環(huán)境,防止樣本污染;
氣流分選及低運行壓力保證生物樣本的生物活性和完整性;


高認(rèn)可度
截止2019年,大粒徑流式分選平臺在已有超過2000個用戶,發(fā)表文獻(xiàn)數(shù)千篇,產(chǎn)品分布于多個國家大學(xué)和研究所實驗室,應(yīng)用涵蓋各個方面,認(rèn)可度高。


硬件設(shè)計
固定流動室設(shè)計,用性強(qiáng)。COPAS Infinity 為用性設(shè)計,每臺機(jī)器只能用于某個固定粒徑范圍樣品分析分選使用;

根據(jù)系統(tǒng)所配置的流動室光學(xué)核心模塊(Fluidics and Optics Core Assemblies,F(xiàn)OCA)的不同,COPAS Infinity 系統(tǒng)有四種不同的型號。下表為不同規(guī)格 COPAS Infinity 系統(tǒng)所適用的樣品粒徑范圍以及常用的研究對象。



模塊化光學(xué)系統(tǒng)
COPAS Infinity 光學(xué)系統(tǒng)包括激光器、FOCA、軸向光檢測器、FS軸向散射光檢測器、PMT熒光散射傳感器以及濾光片等組成。COPAS Infinity 系統(tǒng)多可以配置3個激光器,軸向光檢測器用于樣品軸向長度(TOF,飛行時間)的測量,樣本阻擋光線的總積分信號決定了樣品光密度(EXT,透光度)的大小。FS檢測器測量樣本軸向小角度散射光量,熒光散射可在四種不同的PMT探測器上同時測量,PMT探測器和濾光片元件也可根據(jù)用戶需求進(jìn)行相應(yīng)配置。


X-Y活動性分選平臺
X-Y分選平臺允許用戶將分析結(jié)束的樣品進(jìn)行分選純化并允許分配到24/48/96/384孔板、離心管或其他容器中,COPAS Infinity 系統(tǒng)允許用戶創(chuàng)建自定義輸出模板,用戶可在軟件上編輯分選程序,包括每個分配位置包含的信息,如每個孔位輸出的樣本類型及個數(shù)等。


集成化功能(Integration)
COPAS Infinity也可作為多步工作站(Workflow)一個組成部分,允許響應(yīng)來自外部控制器和軟件的指令信號觸發(fā)其進(jìn)行工作。

COPAS Infinity的設(shè)計占地面積小,能夠更容易地安裝在商用生物安全柜內(nèi),從而提高安全性和無菌性。
 







多樣化進(jìn)樣方式                     
樣品通常從50mL樣品管種自動加樣,攪拌器輔助防止樣品聚集,從而保證上樣均勻,較大粒徑的樣品可選配750mL和1500mL大型進(jìn)樣杯和攪拌器。另外,針對異常脆弱或易于下沉/上浮的樣品(如脂肪細(xì)胞、植物原生質(zhì)體等),可選擇5mL小型旋轉(zhuǎn)樣品杯OSIS (Oscillating Sample Introduction System) 來進(jìn)行加樣。




LP SamplerTM
LP Sampler(Large Particle Sampler)是門為溫和處理直徑10-1500μm的大顆粒、易碎樣品而設(shè)計的自動加樣系統(tǒng),它能夠從多孔板或培養(yǎng)皿中輕輕抽吸這些樣品,并將其完整、可行地輸送至COPAS Infinity系統(tǒng)。




配置選擇方案
(1) FOCA類型選擇
根據(jù)實驗需求選擇合適規(guī)格型號FOCA 


(2) 多激光配置
多三色激光器可選用于激發(fā)樣品熒光,標(biāo)配488nm藍(lán)色激光器,可選375-660nm激光器


(3) 進(jìn)樣方式選擇
根據(jù)COPAS Infinity規(guī)格不同可選擇50,750或1500mL規(guī)格樣品杯進(jìn)樣,針對特殊樣品(如脂肪細(xì)胞等),可選擇5mL旋轉(zhuǎn)樣品杯進(jìn)行加樣。也可選配Large Particle (LP) Sampler™ 系統(tǒng)可以將10-1500 μm范圍內(nèi)的樣品從多孔板、培養(yǎng)皿或者其他容器中進(jìn)行全自動上樣


(4) 集成化功能(Integration)


完整的高通量分選平臺
COPAS Infinity 大粒徑顆粒物高通量分選平臺可配合LP Sampler組成一套更加完整的高通量分選平臺;
能夠?qū)崿F(xiàn)從多孔板進(jìn)樣到多孔板分選的全自動化操作;




型號:COPAS Infinity & LP Sampler


應(yīng)用域

大粒徑流式分選平臺可用于直徑在2-1500μm的生物或非生物樣本分析分選,以下是來自2000位用戶發(fā)表文章統(tǒng)計的常見應(yīng)用,相關(guān)文獻(xiàn)您可以移步到網(wǎng)站來參閱:/publications


 

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