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重慶致宏生物科技有限公司
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重慶致宏生物科技有限公司
產(chǎn)品型號(hào)RT-01032
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
所 在 地重慶市
聯(lián)系方式：馬文偉查看聯(lián)系方式
更新時(shí)間：2022-07-28 15:24:33瀏覽次數(shù)：299次
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經(jīng)營(yíng)模式：經(jīng)銷(xiāo)商
商鋪產(chǎn)品：20條
所在地區(qū)：重慶重慶市
聯(lián)系人：馬文偉 （經(jīng)理）
品牌：福際
高效的去gDNA能力，能在2min內(nèi)去除模板中的gDNA。
高效的逆轉(zhuǎn)錄體系，只需15min即可完成第1鏈cDNA的合成。
復(fù)雜模板：GC含量較高和二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜模板亦能得到很高效率的逆轉(zhuǎn)。
高靈敏的逆轉(zhuǎn)錄體系，pg級(jí)別的模板也可以得到高質(zhì)量的cDNA。
逆轉(zhuǎn)錄體系熱穩(wěn)定性高，*適反應(yīng)溫度為42℃，在50℃仍具有良好的逆轉(zhuǎn)錄性能。
產(chǎn) 品 名 稱(chēng) | 去基因組第1鏈cDNA合成預(yù)混體系Master Premix(For qPCR) RT EasyTM II(With gDNase) | ||
貨 號(hào) | RT-01031 | RT-01032 | |
規(guī) 格 | 25 × 20 μL rxns | 100 × 20 μL rxns | |
價(jià) 格 | ￥427.00 | ￥1,284.00 | |
| 描 述 | 本產(chǎn)品是專(zhuān)門(mén)為Real Time PCR研制的快速去除基因組DNA污染的逆轉(zhuǎn)錄體系。 5× gDNase Mix能在42°C，2min快速去除RNA中殘留的基因組，有效的避免了基因組對(duì)qPCR結(jié)果的干擾。 | ||
產(chǎn)品介紹
RT EasyTM II(With gDNase)是專(zhuān)門(mén)為Real Time PCR研制的快速去除基因組DNA污染的逆轉(zhuǎn)錄體系。5×gDNase Mix能在42°C，2min快速去除RNA中殘留的基因組，有效的避免了基因組對(duì)qPCR結(jié)果的干擾。
5× RO-EasyTM Mix內(nèi)含福際專(zhuān)門(mén)研制的Foregene Reverse Transcriptase，是一款新型反轉(zhuǎn)錄酶，具有更強(qiáng)的RNA親和性。優(yōu)化后的體系使得逆轉(zhuǎn)錄速率更快，42°C，15min即可完成第1鏈cDNA的合成。
該試劑盒的逆轉(zhuǎn)錄體系在50°C條件下逆轉(zhuǎn)錄酶也能保持良好的活性，因此對(duì)于復(fù)雜的RNA模板更優(yōu)勢(shì)，能輕松的轉(zhuǎn)錄GC含量高、二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的RNA模板。
試劑盒應(yīng)用
v 直接用于RealTime PCR定量分析基因的表達(dá)。
v 可以快速、準(zhǔn)確地對(duì)RNA病毒等微量RNA進(jìn)行分析。
v 高GC含量或具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)RNA模板的逆轉(zhuǎn)錄。
儲(chǔ)存條件
試劑盒保存于-20℃。產(chǎn)品收到后立即存放于-20℃恒溫冰箱中。如果存儲(chǔ)條件適當(dāng)，產(chǎn)品在1年有效期內(nèi)不會(huì)降低任何性能。
劑盒內(nèi)容
5× gDNase Mix：gDNA去除劑，在進(jìn)行RT反應(yīng)前務(wù)必按照操作說(shuō)明使用該試劑(內(nèi)部甘油含量較高，-20℃以上可能不會(huì)結(jié)冰，屬于正?，F(xiàn)象)。
5× RO-EasyTM Mix：包含福際生物專(zhuān)門(mén)研制的Foregene Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor、dNTPs、穩(wěn)定劑、增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑及優(yōu)化配比的逆轉(zhuǎn)錄引物(Random Primer、Oligo(dT)18 Primer)。
Foregene Reverse Transcriptase
Foregene逆轉(zhuǎn)錄酶能夠提供高效、特異性強(qiáng)的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。逆轉(zhuǎn)錄酶表現(xiàn)出很高的親和力，并在 50°C反應(yīng)溫度條件下仍然保持良好的逆轉(zhuǎn)錄活性，能夠很好的逆轉(zhuǎn)錄其他逆轉(zhuǎn)錄酶不能處理的二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的RNA。Foregene Reverse Transcriptase 靈敏度高，使用的RNA 量范圍廣泛(0.1pg≤RNA≤1μg) 。
RT Mix耐受性
經(jīng)測(cè)試分析，2× RT OR-EasyTM Mix對(duì)酒精和胍鹽顯示出很高的耐受性。實(shí)驗(yàn)室純化獲得的RNA常有酒精及胍鹽殘留，對(duì)逆轉(zhuǎn)錄有很強(qiáng)的抑制性，導(dǎo)致逆轉(zhuǎn)錄效果不理想或逆轉(zhuǎn)錄效率低。Foregene RT Easy系列產(chǎn)品對(duì)酒精及胍鹽的耐受能力使得逆轉(zhuǎn)錄更容易、高效率的進(jìn)行。
酒精耐受性分析
胍鹽耐受性分析
RNA模板濃度
(0.1pg-1μg total RNAor 0.01pg-0.1μg mRNA) /20 μL體系。
非特異性擴(kuò)增
Answer
1. 引物設(shè)計(jì)不合理
建議：按照引物設(shè)計(jì)原則進(jìn)行引物的設(shè)計(jì)。
2. 基因組殘留。
建議：確定第1步gDNA去除反應(yīng)溫度為42°C，也可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間至5min。
RT-QPCR無(wú)擴(kuò)增信號(hào)
Answer
1. RNA被降解。
建議：提取RNA的材料盡量新鮮，應(yīng)用高質(zhì)量高純的的RNA。
2. RNA含有抑制劑。
建議：逆轉(zhuǎn)錄抑制劑一般包括SDS、胍鹽、EDTA等，建議通過(guò)70%的乙醇對(duì)RNA沉淀進(jìn)行清洗，除去抑制劑。
3. 引物設(shè)計(jì)問(wèn)題。
建議：按照引物設(shè)計(jì)原則，重新設(shè)計(jì)引物進(jìn)行檢查。
空白對(duì)照出現(xiàn)目的條帶
Answer
1. 操作工具或試劑污染。
建議：實(shí)驗(yàn)所有試劑或器材均應(yīng)高壓滅菌。操作時(shí)應(yīng)小心輕柔，防止將DNA樣品吸入加樣槍內(nèi)或?yàn)R出離心管外。
2. PCR反應(yīng)體系制備時(shí)發(fā)生污染。
建議：操作時(shí)進(jìn)行必要的防護(hù)措施，比如：戴乳膠手套，使用帶濾芯的槍頭。使用防污染體系的real time PCR Mix。
3. 引物出現(xiàn)降解。
建議：使用SDS-PAGE電泳檢測(cè)引物是否發(fā)生降解，更換新的引物進(jìn)行熒光檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。
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