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PCR 各種緩沖液的配方
點擊次數(shù):1226 發(fā)布時間:2014-1-2
PCR 各種緩沖液的配方
電泳緩沖液
50×Tris-乙酸(TAE)緩沖液 終濃度配制1L溶液
成分 各成分的用量
2mol/L Tris堿 242g
1mol/L 冰乙酸 57.1 ml
EDTA (pH=8.0) 18.622g (200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0))
水 補足1L
5×Tris-硼酸(TBE)緩沖液
成分及終濃度 配制1L溶液各成分的用量
445 mmol/L Tris堿 54g
445 mmol/L 硼酸鹽 27.5g 硼酸
10 mmol/L EDTA 20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
水 補足1L
染料
1%溴酚藍(bromophenol blue)
加1g水溶性鈉型溴酚藍于100ml水中,攪拌或渦旋混合直到*溶解。
1%二甲苯青FF(xylene cyanole FF)
溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。
10mg/ml的溴化乙錠(ethidium bromide)
小心稱取1g溴化乙錠,轉(zhuǎn)移到廣口瓶中,加100ml水,用磁力攪拌器攪拌直到*溶解。用鋁箔包裹裝液管,于4℃貯存。
凝膠上樣液(gel loading solutions)
6×堿性凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度 配制10ml溶液各成分用量
0.3 N 氫氧化鈉 300ul 10N 氫氧化鈉
6 mmol/L EDTA 120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
18%聚蔗糖(400型) 1.8g
0.15%溴甲酚綠 15mg
0.25%二甲苯青FF 25mg
水 補足到10ml
6×聚蔗糖凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚藍 1.5ml 1%溴酚藍
0.15%二甲苯青FF 1.5ml 1%二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
15%聚蔗糖(400型) 1.5g
水 補足到10ml
6×溴酚藍/二甲苯青/聚蔗糖凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度 配制10ml溶液各成分用量
0.25%溴酚藍 2.5ml 1%溴酚藍
0.25%二甲苯青FF 2.5ml 1%二甲苯青FF
15%聚蔗糖(400型) 1.5g
水 補足到10ml
6×甘you凝膠上樣液(4℃貯存)
成分及 終濃度配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚藍 1.5ml 1%溴酚藍
0.15%二甲苯青FF 1.5ml 1%二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
50%甘you 3ml
水 3.9ml
6×蔗糖凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度 配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚藍 1.5ml 1%溴酚藍
0.15%二甲苯青FF 1.5ml 1%二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
40%聚蔗糖 4g
水 補足到10ml
10×十二烷基硫酸鈉/甘you
凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度配制10ml溶液各成分用量
0.2%溴酚藍 20mg
0.2%二甲苯青FF 20mg
200 mmol/L EDTA 4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
0.1%SDS 100ul 10% SDS
50%甘you 5ml
水 補足到10ml