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技術(shù)文章

PCR 各種緩沖液的配方

點擊次數(shù):1226 發(fā)布時間:2014-1-2

PCR 各種緩沖液的配方
電泳緩沖液
50×Tris-乙酸(TAE)緩沖液        終濃度配制1L溶液
成分                                          各成分的用量
2mol/L Tris堿                            242g
1mol/L 冰乙酸                            57.1 ml
EDTA    (pH=8.0)                  18.622g (200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0))
水                                               補足1L
 
5×Tris-硼酸(TBE)緩沖液
成分及終濃度 配制1L溶液各成分的用量
445 mmol/L Tris堿                     54g
445 mmol/L 硼酸鹽                     27.5g 硼酸
10 mmol/L EDTA                        20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
水                                                 補足1L
 
染料
1%溴酚藍(bromophenol blue)
加1g水溶性鈉型溴酚藍于100ml水中,攪拌或渦旋混合直到*溶解。
 
1%二甲苯青FF(xylene cyanole FF)
溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。
 
10mg/ml的溴化乙錠(ethidium bromide)
小心稱取1g溴化乙錠,轉(zhuǎn)移到廣口瓶中,加100ml水,用磁力攪拌器攪拌直到*溶解。用鋁箔包裹裝液管,于4℃貯存。
 
凝膠上樣液(gel loading solutions)
6×堿性凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度 配制10ml溶液各成分用量
0.3 N 氫氧化鈉                                         300ul 10N 氫氧化鈉
6 mmol/L EDTA                                         120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
18%聚蔗糖(400型)                                 1.8g
0.15%溴甲酚綠                                           15mg
0.25%二甲苯青FF                                         25mg
水                                                              補足到10ml
 
6×聚蔗糖凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚藍                           1.5ml 1%溴酚藍
0.15%二甲苯青FF                     1.5ml 1%二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA                           100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
15%聚蔗糖(400型)                   1.5g
水                                                    補足到10ml
 
6×溴酚藍/二甲苯青/聚蔗糖凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度                   配制10ml溶液各成分用量
0.25%溴酚藍                         2.5ml 1%溴酚藍
0.25%二甲苯青FF                    2.5ml 1%二甲苯青FF
15%聚蔗糖(400型)                1.5g
水                                                   補足到10ml
 
6×甘you凝膠上樣液(4℃貯存)
成分及                                         終濃度配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚藍                                      1.5ml 1%溴酚藍
0.15%二甲苯青FF                                1.5ml 1%二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA                                     100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
50%甘you                                                3ml
水                                                              3.9ml
 
6×蔗糖凝膠上樣液(室溫貯存)
成分及終濃度 配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚藍                      1.5ml 1%溴酚藍
0.15%二甲苯青FF                1.5ml 1%二甲苯青FF
5 mmol/L EDTA                     100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
40%聚蔗糖                              4g
水                                              補足到10ml
 
10×十二烷基硫酸鈉/甘you

凝膠上樣液(室溫貯存)

成分及終濃度配制10ml溶液各成分用量
0.2%溴酚藍                   20mg
0.2%二甲苯青FF            20mg
200 mmol/L EDTA            4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
0.1%SDS                        100ul 10% SDS
50%甘you                           5ml
水                                     補足到10ml

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