產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Annealing Buffer for RNA Oligos (5×),即RNA寡核苷酸退火緩沖液,可以用于RNA Oligos的退火,可以有效避免RNA Oligos自身形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),有利于退火的正確進(jìn)行。該退火緩沖液不含RNase,可避免RNA的降解。
保存條件
常溫配送。一個(gè)月內(nèi),4 oC保存。-20 oC長(zhǎng)期保存,至少1年有效。
注意事項(xiàng)
1. RNA易降解,需嚴(yán)格遵守RNA操作規(guī)范,防止RNase污染。
2. 本產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究,不得用于臨床診斷和治療,不得用于食品和藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
3. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說(shuō)明
1. 將RNA Oligos用DEPC水配制成200 µM,融化RNA退火緩沖液(5×),混勻備用。
2. 配置如下退火反應(yīng)體系,混勻。
DEPC Water | 30 µL |
RNA退火緩沖液(5×) | 20 µL |
RNA Oligo A (200 μM) | 25 µL |
RNA Oligo B (200 μM) | 25 µL |
總體積 | 100 µL |
3. 退火方法一:將退火反應(yīng)體系置于PCR儀中,設(shè)置反應(yīng)條件:90℃變性1 min,-1℃/60s/cycle緩慢降溫至25℃。程序設(shè)置以Bio-Rad的T100為例為:1. 90℃, 1:00; 2. 90℃, 1:00, -1℃ per cycle; 3. GOTO step 2, 65X; 4. 4℃, ∞。
4. 退火方法二:將退火反應(yīng)體系放于90°C水浴鍋或金屬浴,持續(xù)1 min,后將退火反應(yīng)體系置于一杯含有90°C水的保溫杯中,讓其開(kāi)蓋自然冷卻至室溫。
Note:緩慢降溫對(duì)形成正確的結(jié)構(gòu)是非常有幫助的,降溫過(guò)快將導(dǎo)致錯(cuò)誤高級(jí)結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生。
5. 退火結(jié)束后可以直接用于轉(zhuǎn)染細(xì)胞,也可以-80oC凍存?zhèn)溆谩?/p>
RNA退火緩沖液(5x)
RNA退火緩沖液(5x)
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