人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化試劑盒

HyCyteTM 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化試劑盒

Human Umbilical Cord Marrow Mesenchymal Stem Cells Osteogenic Differentiation Kit 

貨號(hào)：UCHX-D101 

規(guī)格：200 mL/Kit 

人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化試劑盒產(chǎn)品性能穩(wěn)定，可提高臍帶/臍血間充質(zhì)干細(xì)胞成骨/成脂/成軟骨誘導(dǎo)效率；

NOTE：

a. 本產(chǎn)品組分均為無菌分裝，可直接配制成培養(yǎng)基使用；染色液為獨(dú)立包裝組分，請(qǐng)勿與培養(yǎng)基混用。

 b. 配制培養(yǎng)基前，請(qǐng)瞬時(shí)離心各管小劑量試劑以免損失，配制后請(qǐng)?jiān)谟行趦?nèi)使用完畢。

 c. 培養(yǎng)基儲(chǔ)存條件：2~8℃，避光；配制后有效期：3 months。

 d. 本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)，不可用于其他。

成骨誘導(dǎo)步驟

1. 接種誘導(dǎo)細(xì)胞：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，按照2×10^4cells/cm2的細(xì)胞密度接種至包被后的培養(yǎng)器皿中，于37℃，5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)至匯合度60-70%，棄掉上清，加入成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基。

2. 細(xì)胞分化誘導(dǎo)：每2-3天更換成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基，于37℃，5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)約14-21天，并注意觀察細(xì)胞形態(tài)變化。根據(jù)細(xì)胞鈣鹽結(jié)晶析出和鈣質(zhì)結(jié)節(jié)形成的情況，決定終止細(xì)胞誘導(dǎo)的時(shí)間，進(jìn)行染色鑒定。

3. 細(xì)胞固定：吸去培養(yǎng)基使用適量1×PBS清洗一次，棄去后取適量4%中性覆蓋培養(yǎng)器皿底面，室溫固定30-60 min，棄去固定液再使用1×PBS清洗兩次。

4. 茜素紅染色：加入適量茜素紅染液染3~5min，吸去茜素紅染液，用1×PBS清洗兩次，并加入適量1×PBS避免細(xì)胞干燥。

5. 誘導(dǎo)評(píng)估：顯微鏡下觀察成骨染色效果，并進(jìn)行圖像采集和誘導(dǎo)評(píng)估。誘導(dǎo)成功時(shí)，鈣質(zhì)結(jié)節(jié)會(huì)與茜素紅染料結(jié)合后呈現(xiàn)紅色或橘紅色。