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天根 KR211 miRcute增強(qiáng)型miRNA DNA合成試劑盒

天根試劑盒

天根 KR211 miRcute增強(qiáng)型miRNA DNA合成試劑盒采用加A法來(lái)進(jìn)行miRNA cDNA的反轉(zhuǎn)錄。

本試劑盒采用了雙組分形式，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程，降低了操作失誤的可能性。

試劑盒中的miRNA RT Enzyme Mix包含了E.coli Poly(A) Polymerase、RTase和RNasin，其中的E.coli Poly(A) Polymerase不但具有高*效的加A尾效率，還可特異性識(shí)別單鏈 miRNA，避免了具有雙鏈結(jié)構(gòu)的miRNA前體的進(jìn)一步逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)；RTase經(jīng)過(guò)分子改造，去掉了RNase H活性，增加了RNA模板親和力，從而使得miRNA的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)具有較高的效率和靈敏度。

試劑盒中的2× miRNA RT Reaction Buffer包含了miRNA加A尾反應(yīng)和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的所有原料和引物，并經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，可保證miRNA 3'末端的Poly(A)修飾過(guò)程和逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程同時(shí)高效進(jìn)行。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

1. 省時(shí)省力。本試劑盒將miRNA的加A尾反應(yīng)和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合二為一，在減少操作步驟的同時(shí)也節(jié)省了一半的反應(yīng)時(shí)間。另外，本試劑盒為雙組分形式，操作過(guò)程中只需加入RNA模板和兩個(gè)組分即可進(jìn)行miRNA的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。

2. 特異性強(qiáng)。本試劑盒中的E.coli Poly(A) Polymerase和RTase都只針對(duì)單鏈的miRNA進(jìn)行修飾和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，可避免具有二級(jí)結(jié)構(gòu)的miRNA前體進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。

3. 靈敏度高。本試劑盒通過(guò)將加A尾反應(yīng)和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的整合，實(shí)現(xiàn)了miRNA的加A產(chǎn)物可全部進(jìn)行進(jìn)一步的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，大大提高了低豐度miRNA的檢出率。

4. 適用廣泛。本試劑盒可針對(duì)幾乎所有材料提取的miRNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，模板的使用范圍可達(dá)20 pg-2 μg(質(zhì)量范圍)和10 fM-100 pM (濃度范圍)。

應(yīng)用范圍

染料法/探針?lè)╩iRNA的熒光定量研究

注意事項(xiàng)

本試劑盒須與miRcute Plus miRNA熒光定量檢測(cè)試劑盒(FP411)配套使用

圖1. 使用TIANGEN miRcute增強(qiáng)型miRNA cDNA 鏈合成試劑盒(KR211)分別與國(guó)外Q公司(左)和國(guó)內(nèi)T公司(右)的同類(lèi)產(chǎn)品反轉(zhuǎn)錄人類(lèi)miRNA mimics mix，之后用熒光定量檢測(cè)

hsa-miR-133a-3p。結(jié)果顯示，對(duì)于同一RNA樣本，與競(jìng)品(藍(lán)色線(xiàn))相比TIANGEN KR211(紅色線(xiàn))反轉(zhuǎn)錄之后得到的cDNA量更大。KR211具有更高的反轉(zhuǎn)效率。miRNA mimics mix上樣量：2×108 copies；反轉(zhuǎn)錄體系：20 μl，取2 μl定量；定量試劑：TIANGEN miRcute增強(qiáng)型miRNA熒光定量檢測(cè)試劑盒(SYBR Green)(FP411)；使用儀器：ABI 7500 fast。

圖2. 使用TIANGEN miRcute增強(qiáng)型miRNA cDNA鏈合成試劑盒(KR211，上排)與國(guó)外Q公司(下排)的同類(lèi)產(chǎn)品分別反轉(zhuǎn)錄人類(lèi)Total RNA，之后用熒光定量檢測(cè)hsa-miR-122-5p。結(jié)果顯示，對(duì)于同一RNA樣本，與競(jìng)品相比TIANGEN KR211具有更高的靈敏度和穩(wěn)定性，更適合下游實(shí)驗(yàn)。Human Huh7細(xì)胞Total RNA提取采用TRNzol Universal(DP424)。反轉(zhuǎn)錄上樣量：100 ng-1 pg；反轉(zhuǎn)錄體系：20 μl，取2 μl 定量；定量試劑：TIANGEN miRcute增強(qiáng)型miRNA熒光定量檢測(cè)試劑盒(SYBR Green)(FP411)；使用儀器：ABI 7500 fast。產(chǎn)品展示

KR211

阿爾法試劑

企業(yè)介紹

天根生化科技（北京）有限公司是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、客戶(hù)服務(wù)為一體的生物類(lèi)企業(yè)；長(zhǎng)期致力于為廣大客戶(hù)提供從樣本保存到核酸提取、檢測(cè)為一體的整體解決方案。

天根的產(chǎn)品線(xiàn)包括基因組DNA提取，RNA提取，質(zhì)粒提取，DNA產(chǎn)物純化和凝膠回收，PCR/RT-PCR及qPCR產(chǎn)品，表觀遺傳學(xué)相關(guān)（miRNA提取及檢測(cè)試劑盒和甲基化相關(guān)試劑盒），二代測(cè)序（NGS）文庫(kù)構(gòu)建產(chǎn)品和科技服務(wù)，克隆和點(diǎn)突變產(chǎn)品，無(wú)細(xì)胞蛋白表達(dá)，蛋白質(zhì)檢測(cè)相關(guān)產(chǎn)品。還提供實(shí)驗(yàn)室常用儀器和自動(dòng)化工作站，自動(dòng)化核酸提取儀及配套試劑，開(kāi)放式主流自動(dòng)化核酸提取平臺(tái)的整合方案。

天根的產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、制藥、環(huán)境等領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究?？蛻?hù)遍布大學(xué)、研究所、醫(yī)院、檢驗(yàn)所、血站、出入境檢驗(yàn)檢疫等單位。

天根秉承“質(zhì)量為天，服務(wù)為根"的宗旨，堅(jiān)持“CUSTOMER FIRST"的經(jīng)營(yíng)理念，不斷優(yōu)化產(chǎn)品質(zhì)量，為廣大用戶(hù)提供高性?xún)r(jià)比、穩(wěn)定可靠的分子生物學(xué)產(chǎn)品和服務(wù)。

點(diǎn)擊蘇州阿爾法實(shí)驗(yàn)器材有限公司（?）了解更多

12年專(zhuān)注于生物實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備與耗材供應(yīng)，迄今為止已服務(wù)1000+ 客戶(hù)。經(jīng)營(yíng)的儀器類(lèi)產(chǎn)品包括高速振蕩培養(yǎng)箱，二氧化碳振蕩培養(yǎng)箱，恒溫振蕩培養(yǎng)箱，移液器，培養(yǎng)箱，生物反應(yīng)器，發(fā)酵罐，二氧化碳培養(yǎng)箱，超低溫冰箱，液氮罐，滅菌器，超純水機(jī)，天平，離心機(jī)、潔凈工作臺(tái)等。廠商企業(yè)包括知楚儀器、朗基、中科美菱，梅特勒，樂(lè)楓，搏旅、 NEST 、天根、奧盛等80 余家。