樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡要概述

1.準(zhǔn)備HRP工作溶液（50μL）
2.添加HRP標(biāo)準(zhǔn)品和/或測試樣品（50μL）
3.在室溫下孵育10-30分鐘
4.監(jiān)測664±5 nm的吸光度

溶液制備

1.儲備溶液

所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。 避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1. Amplite 紅色過氧化物酶底物儲備液（100X）：
將250μLDMSO（組分E）加入到Amplite 紅色過氧化物酶底物（組分A）的小瓶中以制備100X Amplite 紅色過氧化物酶底物儲備溶液。 應(yīng)立即使用原液，避光。

2. HRP標(biāo)準(zhǔn)溶液（20 U / mL）：
將1mL測定緩沖液（組分C）加入到辣根過氧化物酶（組分D）的小瓶中以制備20U / mL的HRP標(biāo)準(zhǔn)溶液。

3. H2O2儲備溶液（20 mM）：
將22.7μL的3％H2O2（0.88M，組分B）加入977μL的測定緩沖液（組分C）中以制備20mM H2O2儲備溶液。 注意：稀釋的H2O2溶液不穩(wěn)定。 應(yīng)丟棄未使用的部分。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液

HRP標(biāo)準(zhǔn)
在1999μL分析緩沖液（組分C）中加入1μL的20U / mL HRP標(biāo)準(zhǔn)溶液，得到10mU / mL HRP標(biāo)準(zhǔn)溶液（SD7）。 取10 mU / mL HRP標(biāo)準(zhǔn)溶液（SD7）并進(jìn)行1：3連續(xù)稀釋，得到連續(xù)稀釋的HRP標(biāo)準(zhǔn)品（SD6-SD1）和分析緩沖液（組分C）。

3.工作溶液

將50μL的100X Amplite 紅色過氧化物酶底物儲備溶液和50μL的20mM H2O2儲備溶液加入到4.9mL的測定緩沖液（組分C）中以制備HRP工作溶液，避光。