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Invitrogen 反轉(zhuǎn)III

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更新時間:2019-10-14 16:38:27瀏覽次數(shù):443次

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Invitrogen 反轉(zhuǎn)III
產(chǎn)品名稱: SUPERSCRIPT III REV TRANSCRIPT反轉(zhuǎn)錄酶III
貨號:18080-093
規(guī)格:2000U

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Invitrogen  反轉(zhuǎn)III
2000U    1300元

SuperScript® III 反轉(zhuǎn)錄酶 (RT) (SuperScript® III Reverse Transcriptase (RT)) 是 SuperScript® II RT 的專有突變體,在 50°C 具有活性,半衰期為 220 分鐘,使用基因特異性引物 (GSP) 提高特異性,在所有 RT 中 cDNA 產(chǎn)量多。 如果要進(jìn)行特定基因的 RT-PCR 或從總 RNA 或 poly (A)+ RNA 樣品生成 cDNA,該產(chǎn)品十分理想。 和 SuperScript® II 一樣,它可以從單鏈 RNA、DNA 或 RNA:DNA 雜合體合成互補(bǔ) DNA鏈。 通過引入點突變對 SuperScript® III RT 進(jìn)行遺傳改造,這些點突變可以增加半衰期、降低 RNase 活性并增加熱穩(wěn)定性。 進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾后:

  • 50°C 時半衰期為 220 分鐘,獲得gao的 cDNA 產(chǎn)量(圖 1)
  • RNase H 活性降低,獲得更多全長 cDNA
  • 在 50°C 有大活性,用 GSP 增加特異性
  • 能增加 RT 單位而不抑制后續(xù)的 PCR
    應(yīng)用: *鏈 cDNA 合成、陣列標(biāo)記、cDNA 文庫、RT-PCR、引物延伸和 3´ 和 5´ RACE。
    來源: 純化自表達(dá) M-MLV 的 pol 基因的大腸桿菌 (1,2),通過突變增加了熱穩(wěn)定性和半衰期,降低了RNase H 活性。
    性能和質(zhì)量測試: SDS-PAGE 純度;脫氧核糖核酸內(nèi)切酶、脫氧核糖核酸外切酶和核糖核酸酶分析(圖 2)及 cDNA 產(chǎn)物的產(chǎn)量和長度。
    單位定義: 一個單位的 SuperScript® III RT 是在 37°C 的反應(yīng)體系中,使用 poly(A)•oligo(dT)12-18作為模板•引物,在 10 分鐘內(nèi)將 1 納摩爾脫氧核糖核苷酸摻入酸沉淀材料所需的酶量 (3)。
    單位反應(yīng)條件: 50 mM Tris-HCl (pH 8.3)、40 mM KCl、6 mM MgCl 2、1 mM DTT。 0.5 mM [ 3 H]dTTP、0.1 mM poly(A)、0.1 mM oligo(dT)12-18、0.1 mg/ml BSA 和酶,共 50 µl,溫度 37°C,時間 10分鐘。

 

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