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豬口蹄疫ELISA抗體檢測診斷試劑盒使用說明書

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 豬口蹄疫ELISA抗體檢測診斷試劑盒使用說明書

 

【用途】

豬口蹄疫ELISA診斷試劑盒用于檢測豬血清中O型口蹄疫病毒抗體。評估豬場口蹄疫疫苗免疫狀況。豬口蹄疫的流行病學(xué)調(diào)查。

【簡介】

試劑盒由抗原包被的微孔板,酶標(biāo)羊抗豬IgG及其它試劑組成,應(yīng)用間接ELISA原理檢測豬血清中抗O型口蹄疫病毒抗體。

【原理】

本試劑盒是采用經(jīng)純化、滅活、濃縮制成的抗原包被微孔板,在試驗(yàn)中,按操作步驟加入對照血清和待檢血清,經(jīng)溫育后,若樣品中含有抗O型口蹄疫病毒特異性抗體,則將與微孔板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后;再加入酶標(biāo)二抗,與微孔板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,在孔中加TMB底物液,與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,加入HF溶液中止反應(yīng)后,用酶標(biāo)儀630nm波長測定各反應(yīng)孔中的OD值。

【試劑盒主要成分】

1、  包被抗原的微孔板                    2                    96孔)

2、  陰(綠蓋)、陽性(紅蓋)對照血清   1                   1ml/管)

3、  抗豬IgG-HRP結(jié)合物(黃蓋)          1                   22ml/瓶)

4、  20倍濃縮洗滌液 (白蓋)             1                   30ml/瓶)

5、  底物A(紫蓋)液、B(黃蓋)液     1                   12ml/瓶)

6、  終止液 (藍(lán)蓋)                     1                   12ml/瓶)

7、  樣品稀釋液 (透明蓋)               1                   50ml/瓶)

用前準(zhǔn)備

仔細(xì)閱讀說明書,所有試劑在4條件下保存,禁止結(jié)冰,如果干燥袋發(fā)紅不能使用,不用的孔必須密封好以防潮濕對平板有害,不要使平板接觸強(qiáng)光和氧化物。不要使用過期的成分或混合使用成分。注意加樣和沖洗,以確保試驗(yàn)的度和準(zhǔn)確度。操作過程中注意安全,要使用手套,終止液含有氫氟酸使用要小心。所有的廢液要經(jīng)過處理和凈化。

本品為獸用產(chǎn)品。

【未提供的需用材料】

微量加樣器、加液槽、蒸餾水、恒溫箱、酶標(biāo)儀、吸水紙

【注意事項(xiàng)】

1、  試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至室溫。

2、  不同批號試劑盒的試劑組分不得混用。

3、  注意防止試劑盒各組分受污染。

4、  微孔板拆封后避免受潮或沾水每次將剩余的微孔板用封口袋扎緊后盡快置于4。

【試劑配制】

洗滌液:用蒸餾水稀釋20濃縮洗滌液,混勻。

【操作步驟】

1、  取預(yù)包被的微孔板(根據(jù)樣品多少,可拆開分次使用)。用樣品稀釋液將待檢樣品40稀釋后加入板孔中,每孔加100μl。陰、陽性對照各設(shè)2孔,每孔100μl。另設(shè)一空白對照孔,空白對照孔加100μl稀釋液。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出),置37溫育30min。

2、  甩掉板孔中的溶液,用洗滌液洗板3次,300μl/孔,每次靜置3分鐘倒掉,zui后一次在不掉屑干凈吸水紙上拍干。

3、  每孔加酶標(biāo)二抗(抗豬IgG-HRP結(jié)合物)100μl,置37溫育30min

4、  洗滌3, 方法同2。

5、  每孔加底物A液、B液各1(50μl),混勻,室溫(20-25℃)避光顯色10min

6、  每孔加終止液1(50μl),10分鐘內(nèi)測定結(jié)果。

 

【結(jié)果判定】

以空白孔調(diào)零,在酶標(biāo)儀上測各孔OD630值。試驗(yàn)成立的條件是陽性對照孔平均OD630值大于或等于0.4,陰性對照孔平均OD630值必須小于0.2。

樣品OD630值大于0.4,判為陽性;樣品OD630值在0.20.4之間,判為可疑;樣品OD630值小于0.2,判為陰性。

 

【規(guī)格】 96×2   

【有效期】6個(gè)月  

【貯存】 2-8避光保存  

【生產(chǎn)日期】見試劑盒外包裝

 

提示:酶標(biāo)板真空包裝袋若有漏氣,酶標(biāo)板仍然正常有效,不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,請放心使用。

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