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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 丙二醛(MDA)測試盒可見分光光度法

丙二醛(MDA)測試盒可見分光光度法
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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
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更新時間:2023-12-28 21:03:31瀏覽次數(shù):704評價

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貨號 BK-01S6414
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特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:丙二醛(MDA)測試盒可見分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

檢測方法:可見分光光度法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6414

產(chǎn)品分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:

測定意義:

氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質(zhì);后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物,其中包括MDA。通過檢測MDA的水平即可檢測脂質(zhì)氧化的水平。

測定原理:

MDA與硫代酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在532nm有最大吸收峰,進行比色后可估測樣品中過氧化脂質(zhì)的含量;同時測定600nm下的吸光度,利用532nm600nm下的吸光度的差值計算MDA的含量。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

 

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

乙酰胺肉湯生化管  20支

1瓶 A-673細胞株 A-673 低溫運輸和保存

營養(yǎng)肉湯(NB)顆粒 Nutrient Broth 250gQQ截圖20220307153537.png

150次 天凈沙甲基化PCR 2.0試劑盒 Methylation-Specific PCR V2.0 Kit 常溫保存,蛋白K、即用型PCR Mix3.0需要-20℃保存。

100mL MOPS Buffer,0.5M,pH8.5   MOPS Buffer,0.5M,pH8.5   常溫保存

100uL 菠菜RT-PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存

2 ug pNZ8048 pNZ8048 低溫運輸,-20℃保存

M1培養(yǎng)基 M1 Medium 250g

1瓶 SGC-7901細胞株 SGC-7901 低溫運輸和保存

氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典)  250g

10g 葡聚糖 T-500 Dextran T-500 室溫保存

丙二醛(MDA)測試盒可見分光光度法RAP2B  原基因相關(guān)蛋白RAP2B抗體 規(guī)格: 0.2ml

ODF2/Cenexin1  子尾部結(jié)構(gòu)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

MFGE8/BA46  上皮細胞抗原BA46抗體 規(guī)格: 0.2ml

GABA  兔抗γ1氨基丁酸抗體 規(guī)格: 0.2ml

ACEI  管緊張素1轉(zhuǎn)換抑制劑抗體 0.1ml

Goat Anti-Chicken IgG/FITC  FITC標(biāo)記的羊抗雞IgG 規(guī)格: 0.3ml

EIF4B  真核翻譯起始因子4B抗體 規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-rabbit IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

PILR beta  細胞表面受體PILRβ抗體 規(guī)格: 0.2ml

IL-8/CXCL8  白介素8抗體 規(guī)格: 0.1ml

EGF(mouse)  表皮生因子抗體(小鼠) 規(guī)格: 0.1ml

Survivin  細胞凋亡抑制因子抗體 規(guī)格: 0.1ml 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

 


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