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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 過氧化氫(H2O2)測試盒可見分光光度法

過氧化氫(H2O2)測試盒可見分光光度法
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更新時間:2023-12-28 20:08:51瀏覽次數(shù):549評價

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貨號 BK-01S6409
過氧化氫(H2O2)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒 英文名稱:Kovacs's indole Box 產(chǎn)品規(guī)格:5ml*2 甲基紅指示劑盒 英文名稱:Methyl Red Indicator Box 產(chǎn)品規(guī)格:5ml*2 哥倫比亞MUG培養(yǎng)基 英文名稱:Columbia- MUG Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g BDS培養(yǎng)基 英文名稱:BDS Medium 產(chǎn)

商品介紹:

測定意義:

H2O2是生物體內(nèi)最常見的活性氧分子,主要由SODXOD等催化產(chǎn)生,由CATPOD等催化降解。H2O2不僅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互轉(zhuǎn)化的樞紐。一方面,H2O2可以直接或間接地氧化細(xì)胞內(nèi)核酸,蛋白質(zhì)等生物大分子,并使細(xì)胞膜遭受損害,從而加速細(xì)胞的衰老和解體;另一方面H2O2也是許多氧化應(yīng)急反應(yīng)中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。

測定原理:

H2O2與硫酸鈦生成黃色的過氧化鈦復(fù)合物,在415nm有特征吸收。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、丙酮60mL、濃鹽酸10mL、研缽和冰。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費(fèi)代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

過氧化氫(H2O2)測試盒可見分光光度法

50管/48樣

可見分光光度法

BK-01S6409

11.png 

實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

MLCB寒天培地 MLCB Agar 250g

1g 姬姆色素染料 Giemsa Stain 室溫保存

50T 01和0139CR檢測試劑盒   低溫運(yùn)輸,-20℃保存

300µL 山羊抗小鼠IgG(H+L),辣根過氧化物標(biāo)記 Goat Anti-Mouse IgG(H+L),HRP Conjugate -20℃保存

2 ug pBlueScriptR PPP2R1B pBlueScriptR PPP2R1B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

20只/袋 口腔拭子(醫(yī)用簡裝)   

2 ug pFastBac pFastBac 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100µL 小鼠抗GFP標(biāo)簽單抗 Anti GFP-Tag Mouse MAb -20℃保存

1瓶 C127細(xì)胞株 C127 低溫運(yùn)輸和保存

顯色培養(yǎng)基  

500U E.coli DNA聚合 Ι E.coli DNA Polymerase I -20℃保存

過氧化氫(H2O2)測試盒可見分光光度法C9orf86  9號染色體開放閱讀框86抗體 規(guī)格: 0.2mlD.Aspartic acid  D型天冬抗體 規(guī)格: 0.1ml

CCDC147  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白147抗體 規(guī)格: 0.2mlMLX  轉(zhuǎn)化因子樣蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

H Cadherin/CDH13  心臟鈣粘蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlMouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

C11orf21  11號染色體開放閱讀框21抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 規(guī)格: 0.1ml

phospho-PTPN6(Ser591)  磷酸化蛋白酪磷酸1C抗體 規(guī)格: 0.1mlVEGF  管內(nèi)皮生因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit anti-Dog IgG whole serum  兔抗狗IgG抗清 規(guī)格: 1mlGADD45 gamma  生抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γ 規(guī)格: 0.2ml

phospho-Androgen Receptor(Ser660)  磷酸化雄激素受體抗體 規(guī)格: 0.1mlNFAT4  核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白3抗體 0.2ml

SARM1  SARM1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlTFEB  T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子TFEB抗體 規(guī)格: 0.1ml

PLCG 2/PLC gamma 2  磷酯Cγ2抗體 規(guī)格: 0.2mlSM-MHC  心肌肌球蛋白抗體(α-myosin) 規(guī)格: 0.1ml

VWCE  VWCE抗體 規(guī)格: 0.2mlGoat Anti-Guinea pig IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.5ml

Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D  ras基因家族Rab3A--Rab3D抗體 規(guī)格: 0.2mlMitochondrial Pyruvate dehydrogenase kinase 1  丙酮酸脫激1抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-EGFR (Ser1190)  磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1mlDbx2  大腦發(fā)育同源蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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