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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>海藻糖系列>> 海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒可見分光光度法

海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒可見分光光度法
  • 海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒可見分光光度法
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具體成交價以合同協(xié)議為準
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更新時間:2023-12-26 08:50:26瀏覽次數(shù):739評價

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貨號 BK-01S6724
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注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒可見分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣

檢測方法:可見分光光度法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6724

產(chǎn)品分類:海藻糖系列
商品介紹:

測定意義:

海藻糖是功能性低聚糖,具有非還原性、保濕性、熱酸穩(wěn)定性、抗凍結(jié)性等特性,是細胞在不良環(huán)境條件下產(chǎn)生的一種重要的抗逆應(yīng)激物之一,它對生物大分子和生物體組織有著非特異性的保護作用。海藻糖合成酶(Trehalose Synthase)催化麥芽糖合成海藻糖,是海藻糖生物合成的關(guān)鍵途徑之一。

測定原理:

TS催化麥芽糖產(chǎn)生海藻糖,使用糖化酶分解剩余麥芽糖為葡萄糖,通過葡萄糖氧化酶法測定葡萄糖含量,按照麥芽糖減少的量表示海藻糖合酶活性。

需自備的儀器和用品:

分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

5g 亮綠 Brilliant Green 室溫保存

500mL Tris-Tricine-SDS Buffer,10X   Tris-Tricine-SDS Buffer,10X   常溫保存

25Inh.U α2巨球蛋白 α2-Macroglobulin -20℃保存

2 ug pTYB 1 pTYB 1 低溫運輸,-20℃保存

50次 柱式凍存血液DNAout Column Frozen Blood DNAOUT 常溫

2 ug psiSTRIKE psiSTRIKE 低溫運輸,-20℃保存

BL瓊脂培養(yǎng)基 BL Agar Medium 250g

1000U  Thrombin From Bovine Plasma -20℃保存

50T 致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

10mg Hoechst 33258干粉 Hoechst 33258 Powder -20℃干燥避光保存

100mL Imidazole Buffer(咪唑緩沖液),0.5M,pH6.5  Imidazole Buffer,0.5M,pH6.5  常溫保存

海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒可見分光光度法Insulin  胰島素抗體 規(guī)格: 0.1ml

CSNK1G2  酪蛋白激1γ2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Bovine IgM/Gold  膠體金標記的兔抗牛IgM 規(guī)格: 2ml

Hsp93  熱休克蛋白93抗體 規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-human IgM/PE-CY5  PE-CY5標記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

SCN1A  SCN1A抗體 規(guī)格: 0.1ml

Goat Anti-Mouse IgG/PE  PE標記的羊抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

NDUFA1  NADH氧化還原輔1抗體 規(guī)格: 0.2ml

AMACR/P504S  α-甲基酰基輔A消旋抗體 規(guī)格: 0.1ml

AMPK beta 1  苷單磷酸活化蛋白激β1抗體 規(guī)格: 0.1ml

HBAB/AKR1C2  膽汁酸結(jié)合蛋白DDH2抗體 規(guī)格: 0.2ml

FGF14  成纖維細胞生因子14抗體 規(guī)格: 0.2ml 

 


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