小鼠神經(jīng)元細(xì)胞提取物的細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
A2780/V人卵巢癌長春新堿耐藥株
HCT8/V人結(jié)腸癌長春新堿耐藥株
HL-60/Adr人白血病阿霉素耐藥株
K562/Adr人白血病阿霉素耐藥株
A2780/Adr人卵巢癌阿霉素耐藥株
HO-8910/ADR人卵巢癌阿霉素耐藥株
lovo/Adr人結(jié)腸癌阿霉素耐藥株
MCF7/Adr人乳腺癌阿霉素耐藥株
BEL/Adr人肝癌阿霉素耐藥株
SGC7901/Adr人胃癌阿霉素耐藥株
BIU-87/Adr人膀胱癌阿霉素耐藥株
A549/Adr人肺癌阿霉素耐藥株
HL-60/Taxol人白血病紫杉醇耐藥株
K562/Taxol人白血病紫杉醇耐藥株
A2780/Taxol 人卵巢癌紫杉醇耐藥株
HO-8910/Taxol人卵巢癌紫杉醇耐藥株
HCT8/Taxol人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株
A549/Taxol 人肺癌紫杉醇耐藥株
hct116/L人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株
lovo/L人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株
HCT8/L人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株
BEL/L人肝癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株
SMMC7721/L人肝癌奧沙利鉑耐藥株
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