傅經(jīng)理
產(chǎn)品品牌:ZCIBIO(茁彩生物)
產(chǎn)品名稱:大鼠趨化因子2(CXCL2)ELISA試劑盒
英文名稱:Rat CXCL2 ELISA kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
實(shí)驗(yàn)樣本:血清、血漿、組織、細(xì)胞上清或其他生物樣本
應(yīng)用領(lǐng)域:大鼠趨化因子2(CXCL2)ELISA試劑盒僅供科研實(shí)驗(yàn)使用,不得用于臨床診斷
我的標(biāo)準(zhǔn)曲線是平的或者是非線性的,這可能是由于什么原因引起的?
引起不理想的標(biāo)準(zhǔn)曲線的原因有很多,常見(jiàn)的原因例舉如下:
◆ 確定稀釋是否得當(dāng)。
◆ 確定波長(zhǎng)是否正確。
◆ 標(biāo)準(zhǔn)品和樣品必需在15-20分鐘內(nèi)滴加入板內(nèi)。(除非試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)特別說(shuō)明)
◆ 檢查背景是否過(guò)高。
◆ 確定酶標(biāo)板是否正確洗滌。 不恰當(dāng)?shù)南礈炜赡軙?huì)引起具有高背景的平直曲線。
◆ 在測(cè)定過(guò)程中重復(fù)讀板。在超過(guò)建議時(shí)間后讀板會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
◆ 如果高的標(biāo)準(zhǔn)品的讀數(shù)超過(guò)了酶標(biāo)儀的范圍,確定標(biāo)準(zhǔn)品是否正確溶解,孵育時(shí)間和溫度是否準(zhǔn)確。
◆ 為保證實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性請(qǐng)重復(fù)測(cè)定。
◆ 如果使用對(duì)照,對(duì)照的濃度必須在測(cè)定范圍內(nèi)。
◆ 在檢測(cè)和孵育過(guò)程中確定試劑沒(méi)有被污染。
◆ 沒(méi)有任何信號(hào)的平直標(biāo)準(zhǔn)曲線可能是由于酶結(jié)合物或者底物沒(méi)有反應(yīng)。 檢查各個(gè)操作過(guò)程
◆ 由于許多酶標(biāo)儀的限制,因此建議標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)由高向低做復(fù)孔。
我的電腦軟件不支持推薦的數(shù)據(jù)歸納方式,我是否可以用其它的?
◆ 可以,然而,每次測(cè)定好使用說(shuō)明書(shū)中推薦的數(shù)據(jù)歸納方式。使用不同的數(shù)據(jù)歸納方式會(huì)導(dǎo)致結(jié)果的浮動(dòng)。
◆ 對(duì)于不同的計(jì)算機(jī)軟件,將標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度設(shè)定為Y軸,濃度設(shè)定為X軸。用對(duì)數(shù)紙作出的數(shù)據(jù)應(yīng)該是線性的,回歸分析被應(yīng)用于對(duì)數(shù)變換。如果不能使用對(duì)數(shù)紙,則將濃度的對(duì)數(shù)和OD值的對(duì)數(shù)進(jìn)行線性作圖。適曲線由回歸分析決定。
測(cè)定多個(gè)酶標(biāo)板時(shí)是否可以使用同一條標(biāo)準(zhǔn)曲線?
◆ 在測(cè)定不同板中的樣品時(shí),每一個(gè)板都對(duì)應(yīng)一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。技術(shù)錯(cuò)誤或者不同的孵育情況,環(huán)境條件都會(huì)引起酶標(biāo)板之間產(chǎn)生不同結(jié)果。一條標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定的樣品值必需是在相同環(huán)境下產(chǎn)生的,否則就是無(wú)效值。
底物有可能被污染嗎?
◆ 是的。如果測(cè)定時(shí)使用的是堿性磷酸酶或者辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的結(jié)合物,在測(cè)定時(shí)要注意避免污染。污染可能會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)生超過(guò)酶標(biāo)儀范圍的值。避免與金屬或氧化試劑接觸。使用新容器。
底物是否需要在黑暗環(huán)境中進(jìn)行孵育?
◆ 不需要。不過(guò)在孵育過(guò)程中應(yīng)避免陽(yáng)光直射。
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