詳細(xì)介紹
Cat.No.:EZB-miRT3-S
一、試劑盒簡介
本試劑盒是基于莖環(huán)法合成miRNA cDNA di一條鏈的試劑盒,含有基因組DNA去除步驟,可以在室溫條件下反應(yīng)5 min即可去除基因組DNA的污染,保證了后續(xù)實驗結(jié)果更加準(zhǔn)確。本試劑盒主要含有2管成分: gDNA Remover中主要包括濃縮的DNase及Buffer;4× miRNA RT Mix中主要包含了逆轉(zhuǎn)錄所需的除引物以外的所有成分(逆轉(zhuǎn)錄酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTPs等)。只需根據(jù)本試劑盒提供的莖環(huán)序列和目的miRNA的序列設(shè)計針對目標(biāo)miRNA的特異性逆轉(zhuǎn)錄引物,就可快速合成miRNA cDNA di一鏈。
該試劑盒采用的新型MMLV突變體逆轉(zhuǎn)錄酶具有很強的抗*力及擴增能力,擴增效率尤佳,15分鐘得到的擴增產(chǎn)物量可以達(dá)到AMV逆轉(zhuǎn)錄酶大約1h的產(chǎn)物量(Ct值相同),因此*的提高了miRNA的逆轉(zhuǎn)錄效率。后續(xù)逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物建議用于PCR、qPCR等實驗。
二、產(chǎn)品組分
Components | EZB-miRT3-S (50 Preps) |
gDNA Remover | 55 µl |
4× miRNA RT Mix | 275 µl |
Nuclease free ddH2O | 1 ml |
注:以上表格中的反應(yīng)次數(shù)對應(yīng)于20 µl反應(yīng)體系的用量。
三、保存條件
本試劑盒建議置于-20℃保存。
四、試劑盒特點
1、莖環(huán)法microRNA逆轉(zhuǎn)錄原理,能特異性地反轉(zhuǎn)出目的microRNA。
2、含有基因組DNA去除步驟,可充分去除基因組DNA污染,保證后續(xù)實驗結(jié)果更準(zhǔn)確。
3、試劑盒內(nèi)RT Mix已將酶和Buffer預(yù)混好,加樣更方便。
4、可對低至50 copies的microRNA進(jìn)行檢測,靈敏度高。
5、可兼容其他品牌的SYBR Green qPCR Mix。