詳細介紹
原子熒光光度計按數(shù)字[3]鍵進入③Concentration (濃度測定模式或標準曲線模式),選中對應(yīng)的數(shù)字來設(shè)定條件(波長數(shù)目,波長數(shù)值,標準溶液數(shù)目及濃度),設(shè)定完畢后點擊[Enter]鍵確定,所有項目設(shè)定完畢后按數(shù)字[0]鍵確定,等待儀器調(diào)整至準備狀態(tài),此時屏幕上出現(xiàn)AUTOZERO,將盛有空白溶液的比色皿放入樣品室中,按[Start/Stop] 鍵進行零點的自動調(diào)整,自動調(diào)零完成后,將標準溶液置于光路中,按照濃度從低到高順序依次按[Start/Stop] 鍵進行測量,測量完畢后儀器將自動給出標準曲線,標準曲線下方有三項供選擇:①Process(更改標準曲線的坐標和觀察濃度回歸曲線的數(shù)據(jù));②Measure(直接進入樣品的測量);③Print(打印濃度回歸曲線譜圖和數(shù)據(jù)),選中對應(yīng)的數(shù)字就可執(zhí)行相應(yīng)的功能。
原子熒光光度計光度計的設(shè)計原理和工作原理,允許吸光值在一定范圍內(nèi)變化,即儀器有一定的準確度和精確度。如Eppendorf Biophotometer的準確度≤1.0%(1A)。這樣多次測試的結(jié)果在均值1.0%左右之間變動,都是正常的。另外,還需考慮核酸本身物化性質(zhì)和溶解核酸的緩沖液的pH值,離子濃度等:在測試時,離子濃度太高,也會導(dǎo)致讀數(shù)漂移如TE,可大大穩(wěn)定讀數(shù)。樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素:由于樣品中不可避免存在一些細小的顆粒,尤其是核酸樣品。這些小顆粒的存在干擾測試效果。為了大程度減少顆粒對測試結(jié)果的影響,要求核酸吸光值至少大于0.1A,吸光值好在0.1-1.5A。在此范圍內(nèi)混合液不能存在氣泡,空白液無懸浮物,否則讀數(shù)漂移劇烈;必須使用相同的比色杯測試空白液和樣品,否則濃度差異太大;換算系數(shù)和樣品濃度單位選擇一致;不能采用窗口磨損的比色杯;樣品的體積必須達到比色杯要求的小體積等多個操作事項。