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技術(shù)文章

如何處理PCR實(shí)驗(yàn)室污染

閱讀:834發(fā)布時(shí)間:2020-8-11

如何處理PCR實(shí)驗(yàn)室污染

由于*疫情的突發(fā),各地PCR基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)也逐步加快,病毒核酸檢測(cè)是診斷的重要標(biāo)準(zhǔn),pcr實(shí)驗(yàn)室又稱為基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室,利用分子生物學(xué)技術(shù),通過(guò)放大核酸片段,也可以看做是生物體外的特殊核酸復(fù)制。利用基因追蹤系統(tǒng),掌握人體內(nèi)部的病毒含量,試驗(yàn)的精確度可達(dá)到納米級(jí)別,*核酸檢測(cè)也屬于此類技術(shù),診斷的重要標(biāo)準(zhǔn)。

PCR基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室主要就是對(duì)檢測(cè)核酸模板進(jìn)行擴(kuò)增,由此可見(jiàn),易出現(xiàn)的就是對(duì)實(shí)驗(yàn)室交叉污染而導(dǎo)致檢測(cè)的標(biāo)本出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果,所以,PCR實(shí)驗(yàn)室對(duì)預(yù)防交叉污染有著嚴(yán)格的設(shè)計(jì)要求和標(biāo)準(zhǔn)。

現(xiàn)在PCR技術(shù)已經(jīng)在傳染病、腫瘤靶向、生殖遺傳等領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用,但因?yàn)樵摷夹g(shù)對(duì)待測(cè)核酸進(jìn)行了多次、大量的擴(kuò)增,所以即使極微量的污染也容易導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性;其次PCR技術(shù)要求相對(duì)較高,實(shí)驗(yàn)過(guò)程繁復(fù),中間環(huán)節(jié)如果出現(xiàn)遺漏疏忽,就有可能導(dǎo)致結(jié)果假陰性。

PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中易發(fā)生污染產(chǎn)生污染主要有以下4個(gè)原因:

1、是PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的污染。這也是見(jiàn)的污染原因。PCR產(chǎn)物經(jīng)反復(fù)多次的擴(kuò)增,其復(fù)制量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)PCR的檢測(cè)極限,所以即使是極微量的污染也足以造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果假陽(yáng)性。

2、試劑的污染。在試劑的配制過(guò)程中,接觸了污染的容器、移液器、槍頭、溶液等物導(dǎo)致試劑被污染。

3、待測(cè)樣品被污染。放置樣品的容器被污染或由于容器密封不嚴(yán)導(dǎo)致樣品與外界接觸被污染;其次在核酸提取過(guò)程中使用了被污染的移液器或槍頭導(dǎo)致樣品被污染;另外,某些樣品中含毒,若彌散到空氣中則有可能形成交叉污染。

4、氣溶膠污染。若氣溶膠中包含病毒等污染物擴(kuò)散至空氣中極有可能造成PCR產(chǎn)物污染。氣溶膠是由空氣與液體表面摩擦而產(chǎn)生的,開(kāi)蓋、晃動(dòng)反應(yīng)管及污染加樣器的反復(fù)吸樣都可形成氣溶膠從而導(dǎo)致交叉污染。據(jù)計(jì)算一個(gè)氣溶膠顆粒可含48 000 拷貝,因此,應(yīng)尤其重視由氣溶膠導(dǎo)致污染的問(wèn)題。PCR 實(shí)驗(yàn)室只要出現(xiàn)了污染,之前的結(jié)果報(bào)告就變?yōu)闊o(wú)效而且也無(wú)法進(jìn)行其他的實(shí)驗(yàn)操作。必須找出并*清除污染源,才能得到準(zhǔn)確有效的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

Pcr實(shí)驗(yàn)室如何進(jìn)行空間消毒預(yù)防污染?

針對(duì)pcr實(shí)驗(yàn)室的消毒,法國(guó)進(jìn)口的歐菲姆干霧滅菌設(shè)備,采用*的過(guò)氧化氫干霧滅菌技術(shù),達(dá)到枯草芽孢桿菌2.5×10的6次方的殺滅率。方便快捷,滅菌時(shí)間快,腐蝕性極低,安全無(wú)殘留。

法國(guó)歐菲姆過(guò)氧化氫干霧滅菌器采用了進(jìn)的霧化技術(shù),霧化顆粒小于3微米,增效了空間擴(kuò)散均勻性,迅速?gòu)浡錆M整個(gè)空間,不放過(guò)每一處死角,滅菌效果。適應(yīng)大空間滅菌,小空間滅菌更靈活。

歐菲姆過(guò)氧化氫滅菌優(yōu)勢(shì):

1、殺菌效果好,對(duì)嗜熱脂肪桿菌芽孢10分鐘有6個(gè)對(duì)數(shù)值的殺滅率,快速高效去除實(shí)驗(yàn)室核酸污染源。

2、廣譜的殺菌能力,能殺滅包括病原菌、芽孢、及病毒在內(nèi)的200多種微生物。

3、干霧顆粒,擴(kuò)散性非常優(yōu)良,能擴(kuò)散到每一個(gè)衛(wèi)生死角落,在空氣中做不規(guī)則布朗運(yùn)動(dòng)。

4、,無(wú)殘留,安全可靠,*分解。驗(yàn)證資料齊全,提供驗(yàn)證模板。

5、殺菌時(shí)間超短,設(shè)備體積小,操作方便,靈活移動(dòng)滿足不同空間需求,適應(yīng)大空間滅菌。

歐菲姆干霧滅菌器依托國(guó)內(nèi)的微生物控制企業(yè)潤(rùn)聯(lián)環(huán)??萍迹o實(shí)驗(yàn)室提供量身定制的消毒方案。

如何處理PCR實(shí)驗(yàn)室污染

 

 


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