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伊萊博生物科技(上海)有限公司
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更新時間:2025-07-09 09:01:01瀏覽次數(shù):45
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一、HSV-1動物模構(gòu)建常用動物模型選擇
小鼠模型(常用)
品系:BALB/c、C57BL/6、SKH-1無毛小鼠(便于觀察皮膚病變)。
優(yōu)點(diǎn):成本低、操作方便;可模擬急性感染和潛伏感染。
局限性:小鼠對HSV-1的天然抵抗力較強(qiáng),需調(diào)整病毒劑量或免疫抑制。
兔模型(如新西蘭白兔)
應(yīng)用:眼部HSV-1感染(角膜炎模型)、潛伏感染研究。
特點(diǎn):眼部和三叉神經(jīng)節(jié)潛伏感染與人類更相似。
豚鼠模型
優(yōu)勢:可建立生殖器HSV-1感染模型,模擬皮膚-黏膜病變。
二、HSV-1動物模構(gòu)建病毒接種方式與疾病模型
1. 急性感染模型
接種途徑:
角膜劃痕接種:模擬皰疹性角膜炎(病毒滴度通常為1×10?~10? PFU/眼)。
鼻內(nèi)/顱內(nèi)接種:研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染(如腦炎)。
足墊或皮膚接種:觀察局部病變和神經(jīng)侵襲。
表型:
接種后3-7天出現(xiàn)紅腫、潰瘍(皮膚/角膜)、神經(jīng)癥狀(豎毛、癱瘓)。
2. 潛伏-再激活模型
步驟:
物理刺激(紫外線照射、角膜劃痕)。
免疫抑制(環(huán)l酰胺、地s米松)。
應(yīng)激(熱休克、束縛應(yīng)激)。
通過角膜或皮膚接種HSV-1(如KOS或McKrae株)。
急性期后(約7-14天),病毒在三叉神經(jīng)節(jié)(TG)或背根神經(jīng)節(jié)(DRG)進(jìn)入潛伏狀態(tài)。
再激活誘導(dǎo):
檢測潛伏病毒:
PCR檢測神經(jīng)節(jié)中HSV-1基因組(如LAT基因)。
體外神經(jīng)節(jié)培養(yǎng)后檢測病毒復(fù)活。
3. 免疫缺陷模型
應(yīng)用:研究宿主免疫應(yīng)答(如T細(xì)胞缺陷小鼠)。
例如:SCID小鼠或IFN-γ敲除小鼠,感染后癥狀更嚴(yán)重。
三、關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)參數(shù)
病毒株選擇:
實(shí)驗(yàn)室常用株:KOS(低毒)、McKrae(高毒,易再激活)、17syn+(潛伏研究)。
病毒滴度:
小鼠角膜/皮膚:10?~10? PFU;顱內(nèi)接種:103~10? PFU(避免快速致死)。
感染監(jiān)測:
臨床癥狀評分(如眼部病變分級、皮膚損傷面積)。
病毒載量檢測:qPCR(如gB基因)或噬斑試驗(yàn)(Plaque Assay)。
免疫組化:檢測病毒抗原(如HSV-1 gD)。
組織病理:神經(jīng)節(jié)炎癥、神經(jīng)元壞死。
四、注意事項(xiàng)
生物安全:HSV-1為BSL-2病原體,需在二級生物安全柜中操作。
對照設(shè)置:
空白對照(PBS接種)、滅活病毒對照。
動物福利:
顱內(nèi)或高劑量感染可能導(dǎo)致癱瘓/死亡,需設(shè)定人道終點(diǎn)。
潛伏感染驗(yàn)證:
需通過抗病d藥物(如阿x洛韋)清除急性期病毒后再檢測潛伏。
五、局限性及改進(jìn)方向
局限性:
小鼠模型難以w全模擬人類HSV-1的長期潛伏周期。
兔/豚鼠成本高且操作復(fù)雜。
改進(jìn)方向:
人源化小鼠模型(移植人類神經(jīng)節(jié)組織)。
基因編輯動物(如HSV-1受體轉(zhuǎn)基因小鼠)。