伊萊博生物科技(上海)有限公司
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參考價 | ¥ 160 |
訂貨量 | 10件 |
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更新時間:2024-03-14 15:32:46瀏覽次數(shù):335
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流式單標(biāo)步驟通常包括以下幾個關(guān)鍵環(huán)節(jié):
細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備。首先,需要收集目標(biāo)細(xì)胞樣品,如細(xì)胞懸液或組織細(xì)胞液,以獲得細(xì)胞單層的懸浮液。然后,用PBS洗滌細(xì)胞樣品,以去除細(xì)胞培養(yǎng)基中的細(xì)胞培養(yǎng)液和廢棄物。1
制備單標(biāo)熒光染色試劑。科研人員選擇的單標(biāo)熒光染色試劑是一種粘附于目標(biāo)細(xì)胞表面的抗體探針,這些抗體可以特異性地與目標(biāo)抗原結(jié)合,并發(fā)出熒光信號。常用的單標(biāo)染色試劑有FITC(熒光素異硫氰酸酯)、PE(葡萄糖相映射學(xué))等。
染色反應(yīng)。將制備好的單標(biāo)染色試劑加入之前準(zhǔn)備好的細(xì)胞樣品中,進(jìn)行充分的染色反應(yīng)。染色結(jié)束后,用PBS洗滌細(xì)胞樣品,以去除未結(jié)合的熒光抗體。
流式細(xì)胞儀分析。使用流式細(xì)胞儀對染色實驗進(jìn)行分析,得到關(guān)于細(xì)胞表面抗原的熒光信號。流式細(xì)胞儀可以通過激光照射懸浮細(xì)胞,檢測細(xì)胞表面與標(biāo)記抗體結(jié)合的熒光強(qiáng)度。通過流式細(xì)胞儀的檢測系統(tǒng),可以同時分析多個參數(shù),如細(xì)胞大小、熒光染色強(qiáng)度和細(xì)胞表面抗原的表達(dá)水平。2
數(shù)據(jù)分析與報告。通過流式細(xì)胞儀獲得的原始數(shù)據(jù)可以使用不同的軟件進(jìn)行分析,如FlowJo、Kalisto和Cytobank。這些軟件可以檢測和計算細(xì)胞表面抗原的表達(dá)水平,并生成圖形和統(tǒng)計結(jié)果。
這些步驟確保了流式單標(biāo)實驗的準(zhǔn)確性和可靠性。