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伊萊博生物科技(上海)有限公司
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參考價 | ¥ 160 |
訂貨量 | 10件 |
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- 所在地 上海市
更新時間:2024-03-14 15:32:46瀏覽次數(shù):498
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流式單標步驟通常包括以下幾個關鍵環(huán)節(jié):
細胞樣品的準備。首先,需要收集目標細胞樣品,如細胞懸液或組織細胞液,以獲得細胞單層的懸浮液。然后,用PBS洗滌細胞樣品,以去除細胞培養(yǎng)基中的細胞培養(yǎng)液和廢棄物。1
制備單標熒光染色試劑??蒲腥藛T選擇的單標熒光染色試劑是一種粘附于目標細胞表面的抗體探針,這些抗體可以特異性地與目標抗原結合,并發(fā)出熒光信號。常用的單標染色試劑有FITC(熒光素異硫氰酸酯)、PE(葡萄糖相映射學)等。
染色反應。將制備好的單標染色試劑加入之前準備好的細胞樣品中,進行充分的染色反應。染色結束后,用PBS洗滌細胞樣品,以去除未結合的熒光抗體。
流式細胞儀分析。使用流式細胞儀對染色實驗進行分析,得到關于細胞表面抗原的熒光信號。流式細胞儀可以通過激光照射懸浮細胞,檢測細胞表面與標記抗體結合的熒光強度。通過流式細胞儀的檢測系統(tǒng),可以同時分析多個參數(shù),如細胞大小、熒光染色強度和細胞表面抗原的表達水平。2
數(shù)據(jù)分析與報告。通過流式細胞儀獲得的原始數(shù)據(jù)可以使用不同的軟件進行分析,如FlowJo、Kalisto和Cytobank。這些軟件可以檢測和計算細胞表面抗原的表達水平,并生成圖形和統(tǒng)計結果。
這些步驟確保了流式單標實驗的準確性和可靠性。