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更新時間:2024-01-17 13:31:09瀏覽次數(shù):443
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中耳炎動物模型脂多糖誘導
從細菌學及組織學檢查的結(jié)果以及臨床征象的研究表明,SOM可能是中耳的一種輕型的或低毒性的細菌感染,而細菌分解產(chǎn)物——內(nèi)毒素在SOM的發(fā)病機制中起一定的作用。它是細菌死亡時以一種生物活性的形式釋放出來的一種物質(zhì),主要成分為脂多糖(LPS),能引起中耳黏膜結(jié)締組織增生,細胞密度增大,毛細血管的通透性增高,腺體及杯狀細胞增生,分泌增加,并破壞正常的黏膜轉(zhuǎn)運系統(tǒng),促進中耳積液的蓄積,導致SOM的發(fā)生。
其還可以激活補體,使嗜堿性粒細胞或肥大細胞釋放組織胺、5-羥色胺等血管活性介質(zhì)及趨化因子,導致血管擴張,毛細血管通透性增加,白細胞向炎癥病灶部位聚集,促進吞噬。在發(fā)揮吞噬作用的過程中,釋放溶酶體酶等生物活性物質(zhì),破壞致病菌的同時也可損傷鄰近組織,加劇炎癥損傷組織細胞,導致SOM。因此,LPS被大量應用于建立SOM動物模型中。
中耳炎動物模型造模方法:
本模型采用手術(shù)暴露聽泡,每側(cè)聽泡內(nèi)注射脂多糖,誘導大鼠中耳炎形成法。
動物的選擇:6-8周齡,200-300g左右的健康SD大鼠(手術(shù)xian微鏡下查看,無中耳疾?。?,性別不限
制備周期:3天,根據(jù)實驗需求調(diào)整
制備方法:正常對照組正常飼養(yǎng)一周,不做任何干預處理。SD大鼠麻醉后,手術(shù)暴露聽泡,在無菌條件下用50ul微量注射器每側(cè)聽泡內(nèi)注射1mg/ml脂多糖一次,注射量40ul,于注射48小時后處死取樣。對照組大鼠注射40ul的生理鹽水溶液。
通過病理HE染色分析判斷模型:由HE染色結(jié)果圖可知,模型組聽泡黏膜明顯增厚,部分黏膜上皮纖毛排列紊亂,黏膜組織腫脹,可見較多炎性細胞浸潤。
脂多糖(LPS)誘導的SOM模型具有與臨床上SOM患者相似的癥狀。這個造模的方法既強調(diào)了感染性因素在SOM的核心作用,也注意到咽鼓管堵塞的重要作用。
該方法也有一些缺點:出現(xiàn)中耳滲液的幾率也不是很高,而且持續(xù)的時間短。使用聽泡內(nèi)先注入纖維蛋白封閉劑(fibrin sealant)再注入LPS的方法提高單純聽泡內(nèi)注入LPS的方法的成功率,SOM病程也隨之延長。