伊萊博生物科技(上海)有限公司
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更新時(shí)間:2024-01-17 11:32:01瀏覽次數(shù):364
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腎小球腎炎模型建模方法
體重180~200g SD大鼠,造模前先測(cè)定其24h尿蛋白總量,并采血測(cè)血清Cr、BUN濃度。經(jīng)大鼠腹腔注射預(yù)先制備的同種大鼠腎皮質(zhì)加弗氏全佐劑乳液(體重為150~180g SD大鼠,按30mg/kg劑量經(jīng)腹腔注射戊巴bi妥鈉麻醉,常規(guī)消毒腹部皮膚并去毛,沿腹中線作正中切口,無(wú)菌手術(shù)操作進(jìn)腹,暴露腎臟,用絲線結(jié)扎腎動(dòng)脈,自結(jié)扎處向腎臟插管,剪斷腎靜脈,經(jīng)插管用生理鹽水反復(fù)沖洗腎臟至白色,切除腎臟,取腎皮質(zhì)用電動(dòng)勻漿器在冰浴中磨成勻漿,分裝后密封于-10℃冷凍保存。每次臨用時(shí)取皮質(zhì)勻漿25g,加弗氏全佐劑至50ml,吸乳缽中研勻,緩緩加入生理鹽水100ml邊加邊研磨,使乳化全均勻),每次2ml/只,每周注射1次(造模14周共注射7次),于造模8周開始每?jī)芍芡ㄊ占蛞?,進(jìn)行24h尿蛋白定量,并稱體重以調(diào)整注射腎皮質(zhì)的量。造模14周時(shí)除收集模型動(dòng)物尿液測(cè)24h尿蛋白量外,采血作血清Cr、BUN、ALB、 Hb與T-CHO測(cè)定。取腎臟組織作透射電鏡標(biāo)本,電鏡下觀察。
腎小球腎炎模型模型特點(diǎn)
模型大鼠注射。腎皮質(zhì)加弗氏全佐劑后第8周,其24h尿蛋白量已明顯升高,隨注射次數(shù)增加呈進(jìn)行性升高,至14周(注射7次后)時(shí),24h尿蛋白量可升至造模前的12倍左右。模型大鼠全血黏度(高、中、低切變率),血漿黏度及血漿蛋白原含量均顯著增高;14周時(shí)模型大鼠Hb下降,血清ALB下降,T-CHO增高,血清Cr與 BUN無(wú)明顯變化。電鏡下超微結(jié)構(gòu)觀察模型大鼠腎小球毛細(xì)血管GBM不規(guī)則增厚變寬,有的扭曲。在GBM內(nèi)或 GBM靠足細(xì)胞側(cè)有較多成團(tuán)或條帶狀電子致密物沉積,足細(xì)胞損傷明顯,排列紊亂,足突融合,增寬,裂孔膜消失,嚴(yán)重區(qū)有斷裂溶解,毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹,管璧不規(guī)則。