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伊萊博生物科技(上海)有限公司

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片免疫熒光單標(biāo)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
免疫熒光單標(biāo)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
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【簡(jiǎn)單介紹】
免疫熒光單標(biāo)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)是一種將熒光素與抗體連接成熒光抗體,再與待檢標(biāo)本中的抗原反應(yīng),并在熒光顯微鏡下觀察抗原抗體復(fù)合物散發(fā)的熒光,以此對(duì)標(biāo)本中的抗原進(jìn)行鑒定和定位的技術(shù)。

免疫熒光單標(biāo)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)


免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescence technique)又稱(chēng)熒光抗體技術(shù),是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展早的一種。它是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù)。很早以來(lái)就有一些學(xué)者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合,利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行組織或細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。它是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理,先將已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光基團(tuán),再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)。利用熒光顯微鏡可以看見(jiàn)熒光所在的細(xì)胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質(zhì)和定位。


免疫熒光單標(biāo)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理,先將已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光素,制成熒光抗體,再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢測(cè)組織或細(xì)胞內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)。在組織或細(xì)胞內(nèi)形成的抗原抗體復(fù)合物上含有標(biāo)記的熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標(biāo)本,熒光素受外來(lái)激發(fā)光的照射而發(fā)生明亮的熒光(黃綠色或橘紅色),可以看見(jiàn)熒光所在的組織細(xì)胞,從而確定抗原或抗體的性質(zhì)、定位,以及利用定量技術(shù)測(cè)定含量。

免疫熒光有直接法和間接法兩種:

(1)直接法:將標(biāo)記的特異性熒光抗體,直接加在抗原標(biāo)本上,經(jīng)一定的溫度和時(shí)間的染色,用水洗去未參加反應(yīng)的多余熒光抗體,室溫下干燥后封片、鏡檢。

(2)間接法:如檢查未知抗原,先用已知未標(biāo)記的特異抗體與抗原標(biāo)本進(jìn)行反應(yīng),用水洗去未反應(yīng)的抗體,再用標(biāo)記的抗抗體(第二抗體)與抗原標(biāo)本反應(yīng),使之形成抗原—抗體—抗體復(fù)合物,再用水洗去未反應(yīng)的標(biāo)記抗體,干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知抗體,則表明抗原標(biāo)本是已知的,待檢血清為抗體,其它步驟的抗原檢查相同。標(biāo)記的抗抗體是抗球蛋白抗體,同于血清球蛋白有種的特異性。




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