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伊萊博生物科技(上海)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 動(dòng)物行為學(xué)檢測(cè),大中小型動(dòng)物實(shí)驗(yàn),細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù) |
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公司信息
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- www.yilaibohb.com
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參考價(jià) | ¥ 200 |
訂貨量 | 1 件 |
- 型號(hào)
- 品牌 其他品牌
- 廠商性質(zhì) 其他
- 所在地 上海市
更新時(shí)間:2024-07-26 09:27:08瀏覽次數(shù):1348
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細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)原理
細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位檢測(cè)(JC-1)是一種碳氰化合物類(lèi)陽(yáng)離子熒光染料,可作為檢測(cè)線(xiàn)粒體跨膜電位指示劑。JC-1在細(xì)胞內(nèi)以聚合體和單體兩種不同的物理形式存在,分別處于不同的熒光發(fā)射峰。當(dāng)JC-1 濃度低或膜電位水平低時(shí),主要以單體形式存在,激發(fā)波長(zhǎng)為527nm,呈綠色熒光;當(dāng)JC-1濃度升高或線(xiàn)粒體膜電位水平較高時(shí),形成聚合物,發(fā)出紅色的熒光,激發(fā)波長(zhǎng)為590nm。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),線(xiàn)粒體跨膜電位被去極化,JC-1從線(xiàn)粒體內(nèi)釋放,紅光強(qiáng)度減弱,以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光,根椐這一特征就可以檢測(cè)線(xiàn)粒體膜電位的變化。
實(shí)驗(yàn)流程
1. 細(xì)胞培養(yǎng);
2. 用適當(dāng)?shù)姆椒ㄕT導(dǎo)細(xì)胞凋亡,同時(shí)設(shè)立陰性依照組合陽(yáng)性對(duì)照組,收集細(xì)胞;
3. 用PBS洗滌細(xì)胞三次,收集不多于1×106的細(xì)胞;
4. 取100 μL 10×Incubation Buffer加900μL**去離子水稀釋成1×Incubation Buffer,混勻并預(yù)熱至37℃;
5. 吸取500 μL 1×Incubation Buffer,加入1μL JC-1,渦旋混勻配成JC-1工作液;
6. 取500 μL JC-1工作液將細(xì)胞均勻懸浮,37℃,5% CO2的培養(yǎng)箱中孵育15~20min。
7. 室溫離心(2000rpm,5min)收集細(xì)胞,用1×Incubation Buffer洗兩次;
8. 吸取500 μL 10×Incubation Buffer重新懸浮細(xì)胞;
9. 流式細(xì)胞儀檢測(cè),分析。
客戶(hù)提供
細(xì)胞株(凍存株或培養(yǎng)好的細(xì)胞),相關(guān)藥品或MMP檢測(cè)試劑盒(可代購(gòu))
公司提供
實(shí)驗(yàn)步驟、結(jié)果圖、數(shù)據(jù)結(jié)果和分析報(bào)告
實(shí)驗(yàn)周期:1-2周,具體需要根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況及實(shí)驗(yàn)內(nèi)容而定。
伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗(yàn),具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實(shí)驗(yàn)平臺(tái)近1000平方米,擁有的儀器設(shè)備、細(xì)胞庫(kù)、樣本保存庫(kù)等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心近1800平方米,可滿(mǎn)足同時(shí)飼養(yǎng)清潔級(jí)和SPF級(jí)動(dòng)物。核心實(shí)驗(yàn)技術(shù)團(tuán)隊(duì)主要來(lái)自大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)等重點(diǎn)高校及科研機(jī)構(gòu),能夠?yàn)榭蛻?hù)提供研究方案策劃、項(xiàng)目實(shí)施及項(xiàng)目深度分析等方面的技術(shù)支持。公司目前參與研究項(xiàng)目已經(jīng)涵蓋心腦血管、腫瘤、內(nèi)分泌、生殖、免疫、神經(jīng)等諸多領(lǐng)域。