伊萊博生物科技(上海)有限公司
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參考價 | ¥ 200 |
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更新時間:2024-07-26 09:27:08瀏覽次數(shù):1063
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細胞線粒體膜電位檢測
實驗原理
細胞線粒體膜電位檢測(JC-1)是一種碳氰化合物類陽離子熒光染料,可作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-1在細胞內(nèi)以聚合體和單體兩種不同的物理形式存在,分別處于不同的熒光發(fā)射峰。當JC-1 濃度低或膜電位水平低時,主要以單體形式存在,激發(fā)波長為527nm,呈綠色熒光;當JC-1濃度升高或線粒體膜電位水平較高時,形成聚合物,發(fā)出紅色的熒光,激發(fā)波長為590nm。當細胞發(fā)生凋亡時,線粒體跨膜電位被去極化,JC-1從線粒體內(nèi)釋放,紅光強度減弱,以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光,根椐這一特征就可以檢測線粒體膜電位的變化。
實驗流程
1. 細胞培養(yǎng);
2. 用適當?shù)姆椒ㄕT導細胞凋亡,同時設立陰性依照組合陽性對照組,收集細胞;
3. 用PBS洗滌細胞三次,收集不多于1×106的細胞;
4. 取100 μL 10×Incubation Buffer加900μL**去離子水稀釋成1×Incubation Buffer,混勻并預熱至37℃;
5. 吸取500 μL 1×Incubation Buffer,加入1μL JC-1,渦旋混勻配成JC-1工作液;
6. 取500 μL JC-1工作液將細胞均勻懸浮,37℃,5% CO2的培養(yǎng)箱中孵育15~20min。
7. 室溫離心(2000rpm,5min)收集細胞,用1×Incubation Buffer洗兩次;
8. 吸取500 μL 10×Incubation Buffer重新懸浮細胞;
9. 流式細胞儀檢測,分析。
客戶提供
細胞株(凍存株或培養(yǎng)好的細胞),相關藥品或MMP檢測試劑盒(可代購)
公司提供
實驗步驟、結(jié)果圖、數(shù)據(jù)結(jié)果和分析報告
實驗周期:1-2周,具體需要根據(jù)細胞生長情況及實驗內(nèi)容而定。
伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗,具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務體系。目前已自建細胞、分子、病理等實驗平臺近1000平方米,擁有的儀器設備、細胞庫、樣本保存庫等。動物實驗中心近1800平方米,可滿足同時飼養(yǎng)清潔級和SPF級動物。核心實驗技術團隊主要來自大學、復旦大學、上海交通大學等重點高校及科研機構(gòu),能夠為客戶提供研究方案策劃、項目實施及項目深度分析等方面的技術支持。公司目前參與研究項目已經(jīng)涵蓋心腦血管、腫瘤、內(nèi)分泌、生殖、免疫、神經(jīng)等諸多領域。