為了探索雞白介素-2（IL-2）對(duì)雞新城疫病毒（NDV）F蛋白免疫效果的增強(qiáng)作用,本研究通過重疊延伸PCR技術(shù)（SOE-PCR）利用連接子（G2SG3S）將雞IL-2基因和雞NDV F基因串連,克隆至真核表達(dá)載體pcDNA3.1（+）,構(gòu)建了表達(dá)質(zhì)粒pcDNA-IL-2-F。通過脂質(zhì)體介導(dǎo)DNA瞬時(shí)轉(zhuǎn)染法,將重組質(zhì)粒pcDNA-IL-2-F和pcDNA-F分別轉(zhuǎn)染雞胚成纖維細(xì)胞,Western b
抗人白介素2（IL-2）抗體（HRP標(biāo)記）說明書
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名 稱：抗人白介素2（IL-2）抗體（HRP標(biāo)記）。
目 錄 號(hào)：YP100002
亞 型：IgG
緩 沖 液：0.01mol/L的PBS、pH：7.2、0.2%Procline-300。
免 疫 原：人白介素2（IL-2）。
制備方法：取健康BALB/C小鼠單抗腹水。
純化方法：親和純化。
標(biāo)記方法：HRP偶聯(lián)標(biāo)記
應(yīng)用范圍：適用于ELISA、CLIA、WB、IHC、流式等實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品純度：不低于總蛋白的95%。
儲(chǔ)存方法：存放在-20℃。
注意事項(xiàng)：避免反復(fù)凍融。
有效期限：請(qǐng)您在管體注明有效期內(nèi)使用。
使用建議：本產(chǎn)品可以用于免疫學(xué)反應(yīng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)，更多信息請(qǐng)咨詢技術(shù)人員。
為了探索雞白介素-2(IL-2)對(duì)雞新城疫病毒(NDV)F蛋白免疫效果的增強(qiáng)作用,本研究通過重疊延伸PCR技術(shù)(SOE-PCR)利用連接子(G2SG3S)將雞IL-2基因和雞NDV F基因串連,克隆至真核表達(dá)載體pcDNA3.1(+),構(gòu)建了表達(dá)質(zhì)粒pcDNA-IL-2-F。通過脂質(zhì)體介導(dǎo)DNA瞬時(shí)轉(zhuǎn)染法,將重組質(zhì)粒pcDNA-IL-2-F和pcDNA-F分別轉(zhuǎn)染雞胚成纖維細(xì)胞,Western blot驗(yàn)證表明,pcDNA-IL-2-F和pcDNA-F均能瞬時(shí)表達(dá)F蛋白,表達(dá)蛋白分別為76.0和59.6 kD,表達(dá)蛋白的大小與預(yù)期一致并具有抗原性。將表達(dá)質(zhì)粒免疫SPF雞(Gallus domedticus),6 d后開始用ELISA方法檢測NDV的特異抗體,免疫20 d后,用F48E9進(jìn)行攻毒。結(jié)果顯示,免疫pcDNA-IL-2-F的雞群產(chǎn)生的抗體水平(P<0.05)高于混合免疫pcDNA-IL-2和pcDNA-F,高于免疫pcDNA-F的雞群,但比免疫Lasota組的抗體水平要低。攻毒試驗(yàn)說明免疫pcDNA-IL-2-F組比免疫其他質(zhì)粒組保護(hù)率高,這說明串連表達(dá)的免疫效果要好于二者的聯(lián)合使用,為病毒病疫苗的研制提供了思路。
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