良好的儀器和準確的操作是保證大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒準確性和可靠性的條件。用于ELISA的蒸餾水或去離子水,包括洗滌,應(yīng)該是新鮮的和高質(zhì)量的。有些樣品可以直接測定,有些則需要預(yù)處理。一般試劑盒檢測結(jié)果好主要是因為這三個元素。
1、樣本因素
血清標本可用常規(guī)方法采集,注意避免溶血。紅細胞溶解時,會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)。在以HRP為標記的ELISA中,溶血性樣品可能會增加非特異性顯色。
如果放在冰箱里太久,可以聚合,間接ELISA可以加深背景。珠子、試管、磁性球體、ELSIA和外來試劑都與特殊儀器一起使用,如果嚴格遵循操作,將獲得正確的結(jié)果。加樣時,添加劑應(yīng)加到雷薩板的孔底,避免加到孔壁上部,注意不要溢出或產(chǎn)生生氣的氣泡。對于這種測定,需要稀釋的血清,可以在加入樣品之前在試管中根據(jù)稀釋度稀釋。
2、ELISA樣品添加步驟
一般在大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒中,加樣有三個步驟,即加樣、加酶結(jié)合物、加底物。冷凍血清融化后,蛋白質(zhì)部分濃縮,分布不均勻,要充分攪拌,輕輕攪拌,避免產(chǎn)生氣泡。可以倒著混,在混音器上應(yīng)該不會強烈震蕩。血漿標本的制備需要抗凝劑,而血清標本只有在血清自然凝固、收縮后才能獲得。也可以在板孔中加入稀釋液,再加入血清樣本,然后在微型搖床上搖勻1分鐘,確?;旌稀?/div>
一般來說,5天以內(nèi)測定的血清標本可以放在4℃下,超過一周測定的需要低溫保存。有各種各樣的樣品可用于elisa測定。體液、分泌物和排泄物都可以作為樣本來測定某些抗體或抗原成分。ELISA試劑盒不需要的部分要及時放回冰箱。
3、固體載體
大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒的操作因固相載體的形成而異,板斑一般用于海中醫(yī)療維護。除特殊情況外,血清用作醫(yī)療維護中的測試樣本。添加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物液時,可使用定量多通道加液器快速完成加液過程。如果有細菌污染,細菌中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。每次添加標本時,應(yīng)更換吸嘴,避免交叉污染,也可使用一次性定量塑料管進行加樣。