HBmito Crimson 線粒體內(nèi)膜深紅色熒光染料
1.產(chǎn)品信息
產(chǎn)品 | 貨號(hào) | 包裝(固體) | 適用范圍 | 凍存條件 | 保質(zhì)期 |
HBmito Crimson |
WHB-1 |
5 nmol | 熒光顯微鏡、Confocal、 SIM、STED |
常溫運(yùn)輸,-20℃避光 長期保存 |
一年 |
2.產(chǎn)品簡介
HBmito Crimson 是一 種 具 有細(xì) 胞 膜 通 透性 的 細(xì) 胞 線 粒體 內(nèi) 膜 (Inner mitochondria membrane, IMM)深紅色熒光探針,對(duì)線粒體內(nèi)膜有高度選擇性,可以用于活細(xì)胞線粒體內(nèi)膜 特異性熒光染色。共聚焦顯微鏡下呈現(xiàn)清晰線粒體形貌;在超高分辨顯微鏡下呈現(xiàn)清晰線粒體 嵴結(jié)構(gòu)。HBmito Crimson 與線粒體內(nèi)膜作用較強(qiáng),用甲醛等固定后,探針分子可以被保留在線粒體內(nèi)膜。HBmito Crimson 非常適合用于多種場(chǎng)景下的線粒體成像,尤其在 SIM 和 STED等超分辨成像和細(xì)胞分選等領(lǐng)域。
3. 實(shí)驗(yàn)步驟
活細(xì)胞線粒體染料可參考以下步驟:
3.1 在 HBmito Crimson 中加入 25 μL 新鮮干燥的 DMSO,混合均勻,得到 200 μM 母液。
3.2 將培養(yǎng)基預(yù)熱至 37 ℃,將 HBmito Crimson 母液按照 1000 - 5000 倍稀釋比例加入到預(yù) 熱的培養(yǎng)基中,稀釋后的染液建議盡快使用,久置后可能導(dǎo)致部分染料分解或沉淀。
3.3 吸去細(xì)胞原有的培養(yǎng)基,更換為稀釋好的培養(yǎng)基染液,在培養(yǎng)箱中孵育 15 分鐘。
3.4 用預(yù)熱的培養(yǎng)基清洗細(xì)胞一至兩次,即可用于熒光成像。
注:我們建議對(duì)大多數(shù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞使用 200-300 nM,如 HeLa、COS7、U-2OS、Vero
細(xì)胞、原代神經(jīng)元、脂肪細(xì)胞和肝細(xì)胞;對(duì)組織染色使用 500-600 nM。
不同樣品染色條件有所差異,建議起始染色方法為 1000 倍稀釋,15 分鐘染色,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際染色效果進(jìn)行調(diào)整。
4.染料光學(xué)性能
λEx | λEm | λSTED |
658 nm | 678 nm | 775 nm |