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多胺氧化酶(PAO)檢測試劑盒

參   考   價(jià): ¥ 1140

訂  貨  量: ≥1支

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號:SH0077

品       牌:其他品牌

廠商性質(zhì):生產(chǎn)商

所  在  地:南京市

更新時(shí)間:2024-03-05 14:42:28瀏覽次數(shù):136

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CAS SH0077 產(chǎn)品規(guī)格 50管/48樣
級別 超純、高純
多胺氧化酶是催化生物體內(nèi)多胺氧化的關(guān)鍵酶,通過調(diào)節(jié)體內(nèi)多胺水平和生成物的濃度,參與各種植物體對逆境脅迫的反應(yīng)和生長發(fā)育過程

貨號

名稱

規(guī)格

SH0077

多胺氧化酶(PAO)檢測試劑盒(分光光度法50T/48S)

50管/48樣

正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

多胺氧化酶是催化生物體內(nèi)多胺氧化的關(guān)鍵酶,通過調(diào)節(jié)體內(nèi)多胺水平和生成物的濃度,參與各種植物體對逆境脅迫的反應(yīng)和生長發(fā)育過程。

測定原理:

PAO催化多胺氧化產(chǎn)生過氧化氫,在過氧化氫酶存在的條件下與底物顯色,在550nm下有特征吸收峰,通過測定吸光值增加速率來反映PAO活性。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0077-50T/48S

Storage

試劑一:液體

100ml

4℃

試劑二:液體

6ml

4℃

試劑液體

3ml

4℃

試劑四:液體

3ml

4℃

說明書

一份

自備儀器和用品:

分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

粗酶液提?。?/span>

組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心20min,取上清,置冰上待測。

細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(ml)為500~10001的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后10000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

血清等液體:直接測定。

測定步驟:

1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至550nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 樣本測定

試劑名稱(µl

測定管

試劑一

700

試劑二

100

試劑三

50

樣本

100

試劑四

50

迅速混勻,于550nm下測定初始吸光值A130min后吸光值A2。ΔA=A2-A1。

PAO活性計(jì)算:

1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位定義:每mg組織蛋白在每ml反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.002為一個(gè)酶活力單位。

PAOU/mg protΔA×V反總÷V×Cpr÷0.002÷T =166.67×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位定義:每g組織在每ml反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.002為一個(gè)酶活力單位。

PAOU/g 鮮重)ΔA×V反總÷(W× V÷V樣總)÷0.002÷T =166.67×ΔA÷W

3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

單位定義:每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每ml反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.002為一個(gè)酶活力單位。

PAOU/104 cellΔA×V反總÷(500×V÷V樣總)÷0.002÷T =0.333×ΔA

(4)按液體體積計(jì)算

單位的定義:每ml液體樣本在每ml反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.002為一個(gè)酶活力單位。

PAOU/ml=ΔA×V反總÷V÷0.002÷T =166.67×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;V樣:加入樣本體積,0.1 mlV樣總:加入提取液體積,1 ml;T:反應(yīng)時(shí)間,30 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mlW:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500萬。


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