貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
SH0051 | 尿酸(Uric Acid, UA)含量測(cè)定試劑盒(分光光度法50T/48S) | 50管/48樣 |
正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
UA是鳥類和爬行類動(dòng)物的主要代謝產(chǎn)物,正常人體尿液中產(chǎn)物主要為尿素,含少量尿酸。此外,UA還是重要的抗氧化劑,能清除超氧化物,羥自由基等。體內(nèi)UA生成量和排泄量不平衡會(huì)導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生。例如,血中UA升高會(huì)引起痛風(fēng)、腎功能損害和動(dòng)脈硬化,相反UA降低會(huì)引起惡性貧血,在臨床診斷上具有重要的意義。
測(cè)定原理:
尿酸酶能催化UA生成niaonangsu,CO2及H2O2,H2O2 氧化yatieqinghuajia中的Fe2+ 生成Fe3+ ,Fe3+進(jìn)一步與酚和4-氨基antibilin縮合生成紅色醌類化合物,在505nm下有特征吸收峰,測(cè)定反應(yīng)體系505nm的吸收值,可計(jì)算尿酸的含量。
組成:
產(chǎn)品名稱 | SH0051-50T/48S | Storage |
緩沖液 | 15ml | 4℃ |
試劑一:A粉劑 | 1瓶 | 4℃避光 |
試劑一:B粉劑 | 1瓶 | 4℃避光 |
試劑二:粉劑 | 1瓶 | 4℃避光 |
說明書 | 一份 |
試劑一:
A. 用于標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管,粉劑1瓶,4℃避光保存,使用前加10ml緩沖液溶解。
B. 用于空白管,粉劑1瓶,4℃避光保存,使用前加5ml緩沖液溶解。
試劑二:粉劑1瓶,4℃避光保存,使用前加10ml雙蒸水水置于60℃加熱溶解。
自備儀器和用品:
恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)、1 ml玻璃比色皿和蒸餾水。
樣品的制備:
1、動(dòng)植物組織:建議稱取約0.1g組織,加入1ml生理鹽水或蒸餾水,進(jìn)行冰浴勻漿,然后8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
測(cè)定操作表
標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 | 測(cè)定管 | |
試劑一(μl) | A, 200 | B, 200 | A, 200 |
H2O(μl) | 600 | 800 | 600 |
試劑二(μl) | 200 | ||
樣品(μl) | 200 | ||
混勻,37℃水浴30min,于1ml玻璃比色皿,空白管調(diào)零,測(cè)定505nm處各管吸光值,標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管。 |
UA含量計(jì)算公式
1. 組織:
(1)按樣本重量計(jì)算
尿酸含量(μmol/g 鮮重)=C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷ (W÷V樣總)=0.5×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷ W
(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算
尿酸含量(μmol/mg prot)=C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷ Cpr =0.5×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr
尿酸(μmol/L)= C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×103
=500×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)
C標(biāo):標(biāo)準(zhǔn)品濃度0.5μmol/ml;V樣總:加入提取液體積,1ml;W:樣品質(zhì)量,g ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/ml;103 :1μmol/ L=103μmol/ ml
注意事項(xiàng)
1. 血清樣本請(qǐng)?jiān)?/span>24小時(shí)內(nèi)測(cè)定,或者4℃密封避光保存不超過72小時(shí)。
2. 吸光值大于0.8可用蒸餾水稀釋樣本,并在計(jì)算公式中算入稀釋倍數(shù)。
3. zuidi檢出限為10μmol/L。