自噬檢測(cè)試劑盒2.0測(cè)量自噬空泡并使用選擇性標(biāo)記累積的自自噬是一種應(yīng)激誘導(dǎo)的保護(hù)機(jī)制。該機(jī)制在基礎(chǔ)條件下活性較低,當(dāng)受到某些不利條件如營(yíng)養(yǎng)素耗盡和化學(xué)或環(huán)境應(yīng)激時(shí),該機(jī)制通過(guò)溶酶體介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)容物的大量降解被真核細(xì)胞利用。增加的自噬活性在癌癥、神經(jīng)變性、心血管疾病和糖尿病的病理學(xué)中的作用已被廣泛認(rèn)識(shí)和普遍研究。如果溶酶體功能被抑制,自噬通量的誘導(dǎo)可以通過(guò)自噬囊泡的增強(qiáng)積累來(lái)可視化,從而防止這些囊泡的去除。
噬空泡的新型染料監(jiān)測(cè)溶酶體抑制的活細(xì)胞中的自噬通量。488 nm-可激發(fā)的綠色染料已經(jīng)通過(guò)鑒定可滴定的功能部分進(jìn)行了優(yōu)化,所述可滴定的功能部分允許溶酶體的最小染色,同時(shí)在摻入前自噬體、自噬體和自溶酶體(自噬溶酶體)中時(shí)表現(xiàn)出明亮的熒光。試劑盒還包括用于核染色的Hoechst 33342染料、自噬誘導(dǎo)劑(雷帕霉素)和溶酶體抑制劑。
作用機(jī)制
探針是陽(yáng)離子兩親性示蹤劑(CAT)染料,其以與誘導(dǎo)磷脂質(zhì)病的藥物類(lèi)似的方式快速分配到細(xì)胞中。仔細(xì)選擇染料上的可滴定功能部分防止其在溶酶體內(nèi)的積累,但能夠標(biāo)記與自噬途徑相關(guān)的液泡
CYTO-ID細(xì)胞自噬檢測(cè)試劑盒 2.0 用于監(jiān)測(cè)活細(xì)胞中自噬的更明亮且更光穩(wěn)定的非轉(zhuǎn)染定量測(cè)定
1、更亮、更耐光的染料特異性地染色自噬囊泡
2、快速,無(wú)需轉(zhuǎn)染
3、溶酶體染色可忽略不計(jì),可減少其他染料的背景
4、促進(jìn)自噬激活劑和抑制劑的高通量篩選
5、被廣泛引用