來(lái)自擬南芥AKIN beta 3序列的klh共軛肽，UniProt: Q9ZUU8, TAIR: AT2G28060

主機(jī)的兔子

單克隆多克隆

親和純化的血清在PBS, ph7,4

格式凍干

量50µg

復(fù)配時(shí)，加入50µl無(wú)菌水

-20°C保存凍干/重組;一旦重組，使公平，以避免重復(fù)凍融循環(huán)，請(qǐng)記住，在打開(kāi)之前，旋轉(zhuǎn)管短暫，以避免任何損失，凍干材料粘附在瓶蓋或管的兩側(cè)

Western blot (WB)

推薦稀釋倍數(shù)1:10 00 (WB)

預(yù)期|表觀MW 12,7 kDa

將重組的AKIN β 3用10%的SDS-PAGE分離，并通過(guò)半干印跡法轉(zhuǎn)移到PVDF膜上(1h)。用5%的低脂奶粉在TBS-T (0.01% Tween 20)中進(jìn)行印跡封閉，室溫(RT)攪拌1h。然后在一抗中，以1%低脂奶粉1:1 000稀釋，攪拌，4°C孵育過(guò)夜。倒出抗體溶液，簡(jiǎn)單漂洗印跡，RT - TBS-T中攪拌洗滌3次，共5分鐘。然后用二抗(Agrisera中偶聯(lián)的抗兔IgG馬蘿卜過(guò)氧化物酶)稀釋至1:10 000，加入1%低脂奶粉，在TBS-T中攪拌，RT加熱1h。根據(jù)制造商的說(shuō)明，用低皮圖范圍的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑沖洗斑點(diǎn)5次，沖洗5分鐘，沖洗2分鐘。曝光時(shí)間為10分鐘。