通過我們的大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)產(chǎn)生重組小鼠β神經(jīng)生長因子,并表達(dá)編碼Ser122-Gly241的靶基因。
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稱為:β神經(jīng)生長因子;β-神經(jīng)生長因子;神經(jīng)生長因子
制劑(制定)
從20毫米Tris,150毫米NaCl,pH8的0.2μm過濾溶液中冷凍干燥。0
質(zhì)量控制(質(zhì)量控制)
純度:通過還原SDS-PAGE測定,純度大于95%。
內(nèi)毒素:通過LAL試驗(yàn)測定小于0.1 ng/ug(1 EU/ug)。
生物活性:在使用TF-1人類紅白血病細(xì)胞的細(xì)胞增殖試驗(yàn)中測量。
該效應(yīng)的ED50為0.3-1.5 ng/ml。
圖片1.png
復(fù)溶(重組)
在打開管道之前,務(wù)必對管道進(jìn)行離心分離。不要通過漩渦或移液管混合。
不建議將其重新配制成低于100μg/ml的濃度。
將凍干蛋白溶解在蒸餾水中。
請將重組溶液等分,以盡量減少凍融循環(huán)。
保存(儲(chǔ)存)
凍干蛋白質(zhì)應(yīng)在<-20°C下儲(chǔ)存,但在室溫下應(yīng)穩(wěn)定3周。重組蛋白溶液可在4-7°C下儲(chǔ)存2-7天。在<-20°C的溫度下,等分樣品在3個(gè)月內(nèi)保持穩(wěn)定。
背景(背景)
NGF是神經(jīng)營養(yǎng)因子家族中發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)成員,包括腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、神經(jīng)營養(yǎng)因子-3(NT-3)和神經(jīng)營養(yǎng)因子-4(NT-4)。這些蛋白質(zhì)屬于半結(jié)生長因子家族,具有穩(wěn)定的二聚體結(jié)構(gòu)。小鼠β-NGF是兩種120氨基酸多肽的同型二聚體。它在氨基酸水平上與人類β-神經(jīng)生長因子有大約90%的同源性,與大鼠β-神經(jīng)生長因子有95.8%的同源性。NGF信號在神經(jīng)保護(hù)和修復(fù)中起著重要作用。β-NGF作為B淋巴細(xì)胞的生長和分化因子,提高B細(xì)胞的存活率。它是一種有效的神經(jīng)營養(yǎng)因子,通過其受體β-NGFR發(fā)出信號,在感覺和交感神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育和保存中起著至關(guān)重要的作用。
電泳(SDS-PAGE)
參考文獻(xiàn)(參考文獻(xiàn))
Gq介導(dǎo)的鈣動(dòng)力學(xué)和膜張力調(diào)節(jié)軸突可塑性[J]。凱瑟琳·M·皮爾斯。等人,bioRxiv。2019
小鼠背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元原代培養(yǎng)的新方法[J]。李世剛。等人,biorxiv。2018