試劑盒組分詳細(xì)描述：
一、Hypoxyprobe-1（Pimonidazole HCl）
Hypoxyprobe-1 是2-硝基咪唑的替代物，其化學(xué)名和*成分是Pimonidazole hydrochloride（Pimonidazole HCl），分子量為290.8，水溶性為400mM（=116 mg/ml），紫外吸收（324nm）的吸光系數(shù)為7020（0.9%生理鹽水）。
Hypoxyprobe-1的粉末和溶液形式皆具化學(xué)穩(wěn)定性。比如，固體形式的Hypoxyprobe-1于柔弱光線下室溫保存2年，UV和HPLC分析法評(píng)估無(wú)任何降解發(fā)生。溶于0.9%生理鹽水的Hypoxyprobe-1，濃度100g/L置于2-8℃保存4.5年，UV和HPLC分析法評(píng)估無(wú)任何降解發(fā)生。
作用機(jī)理：缺氧細(xì)胞中Pimonidazole被還原后得以活化。這一活化的中間物與蛋白質(zhì)、多肽和氨基酸中的巰基基團(tuán)（thiol groups）形成穩(wěn)定的加合物。Mab1抗體結(jié)合這些加合物從而能借由免疫化學(xué)法來(lái)檢測(cè)。
二、Hypoxyprobe™-F6 (CCI-103F)
Hypoxyprobe-F6（CCI-103F）是帶有6個(gè)磁性相等氟原子的六氟-2-硝基咪唑，分子量為337.2，水溶性為5.3mM（=1.8 mg/ml）。CCI-103F通常以10% DMSO/花生油混合物的形式腹腔注射入動(dòng)物體內(nèi)。

CCI-103F儲(chǔ)存于弱光下非常穩(wěn)定。
作用機(jī)理：缺氧細(xì)胞中CCI-103F被還原后得以活化。這一活化的中間物與蛋白質(zhì)、多肽和氨基酸中的巰基基團(tuán)（thiol groups）形成穩(wěn)定的加合物。一抗（Anti-CCI-103F抗血清）結(jié)合這些加合物從而能借由免疫化學(xué)法來(lái)檢測(cè)。
三、Anti-Pimonidazole rabbit antiserum (PAb2627)抗體和Anti-CCI-103F rabbit antiserum (PAbF6)抗體
PAb2627和PAbF6分別特異結(jié)合還原活化后的Pimonidazole 和CCI-103F形成的蛋白加合物，以稀釋的抗血清形式提供。
感興趣組織可用免疫組化檢測(cè)（IHC），冰凍切片或者福爾馬林固定的石蠟包埋切片；也可組織降解后用流式分析法檢測(cè)；以及WB；
對(duì)福爾馬林固定、石蠟包埋的連續(xù)性組織切片進(jìn)行免疫過(guò)氧化物分析，使用100μl anti-pimonidazole或anti-CCI-103F（1:500稀釋）孵育。顯色的山羊抗兔二抗用來(lái)顯示缺氧標(biāo)記加合物的分布情況。

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