乳酸是手性的并且具有兩個光學(xué)異構(gòu)體：L-乳酸和D-乳酸。在代謝和運動過程中，丙酮酸經(jīng)常通過乳酸脫氫酶（LDH）從丙酮酸中產(chǎn)生。監(jiān)測乳酸水平是評估組織需氧量和利用之間平衡的好方法，對研究細胞和動物生理學(xué)很有用。D-乳酸不被哺乳動物代謝，其從體內(nèi)的清除主要取決于腎臟的排泄。D-乳酸和L-乳酸存在于許多發(fā)酵乳制品中，例如酸奶和奶酪，以及腌制蔬菜，腌制的肉和魚中。D-乳酸和L-乳酸（由細菌產(chǎn)生）是食品（例如雞蛋，牛奶，果汁和葡萄酒）的質(zhì)量指標。血液中D-乳酸的異常高濃度通常反映了胃腸道中細菌過度生長。AAT Bioquest的Amplite™乳酸檢測試劑盒（用于L-乳酸檢測的產(chǎn)品目錄號為13814和13815，用于D-乳酸檢測的產(chǎn)品目錄號為13810和13811）提供了基于熒光和吸光度的檢測L-乳酸或D-乳酸的方法生物樣品，例如血清，血漿，尿液以及細胞培養(yǎng)樣品中。在酶聯(lián)測定中，乳酸鹽與NADH成比例相關(guān)，NADH可通過熒光NADH傳感器進行專門監(jiān)測。信號可以通過熒光酶標儀讀取。使用此Fluorometric Amplite™L-乳酸測定試劑盒，我們能夠在100 µL反應(yīng)體積中檢測到低至1.4 µM L-乳酸。s Amplite™乳酸測定試劑盒（用于L-乳酸測定的產(chǎn)品目錄號為13814和13815，對于D-乳酸測定的產(chǎn)品目錄號為13810和13811）提供了基于熒光和吸光度的方法，可用于檢測生物樣品中的L-乳酸或D-乳酸樣本，例如血清，血漿，尿液以及細胞培養(yǎng)樣本。在酶聯(lián)測定中，乳酸鹽與NADH成比例相關(guān)，NADH可通過熒光NADH傳感器進行專門監(jiān)測。信號可以通過熒光酶標儀讀取。使用此Fluorometric Amplite™L-乳酸測定試劑盒，我們能夠在100 µL反應(yīng)體積中檢測到低至1.4 µM L-乳酸。s Amplite™乳酸測定試劑盒（用于L-乳酸測定的產(chǎn)品目錄號為13814和13815，對于D-乳酸測定的產(chǎn)品目錄號為13810和13811）提供了基于熒光和吸光度的方法，可用于檢測生物樣品中的L-乳酸或D-乳酸樣本，例如血清，血漿，尿液以及細胞培養(yǎng)樣本。在酶聯(lián)測定中，乳酸鹽與NADH成比例相關(guān)，NADH可通過熒光NADH傳感器進行專門監(jiān)測。信號可以通過熒光酶標儀讀取。使用此Fluorometric Amplite™L-乳酸測定試劑盒，我們能夠在100 µL反應(yīng)體積中檢測到低至1.4 µM L-乳酸。（D.乳酸檢測的Cat＃13810和13811）提供了基于熒光和吸光度的方法，用于檢測血清，血漿，尿液以及細胞培養(yǎng)樣品等生物樣品中的L-乳酸或D-乳酸。在酶聯(lián)測定中，乳酸鹽與NADH成比例相關(guān)，NADH可通過熒光NADH傳感器進行專門監(jiān)測。信號可以通過熒光酶標儀讀取。使用此Fluorometric Amplite™L-乳酸測定試劑盒，我們能夠在100 µL反應(yīng)體積中檢測到低至1.4 µM L-乳酸。（D.乳酸檢測的Cat＃13810和13811）提供了基于熒光和吸光度的方法，用于檢測血清，血漿，尿液以及細胞培養(yǎng)樣品等生物樣品中的L-乳酸或D-乳酸。在酶聯(lián)測定中，乳酸鹽與NADH成比例相關(guān)，NADH可通過熒光NADH傳感器進行專門監(jiān)測。信號可以通過熒光酶標儀讀取。使用此Fluorometric Amplite™L-乳酸測定試劑盒，我們能夠在100 µL反應(yīng)體積中檢測到低至1.4 µM L-乳酸。

組件

1. 準備L-乳酸鹽工作溶液（50 µL）
2. 加入L-乳酸標準液或測試樣品（50 µL）
3. 在室溫下孵育30分鐘-2小時
4. 監(jiān)測Ex / Em = 540/590 nm時的熒光增加

重要說明
開始實驗前，在室溫下解凍每個試劑盒成分的小瓶。

儲備溶液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，制備后應(yīng)儲存在-20°C下。避免重復(fù)凍融循環(huán)。

1. NAD儲備溶液（100X）：
將100 µL H ₂ O加入NAD小瓶（組分C）中，制成100X NAD儲備溶液。

2. L-乳酸標準溶液（100 mM）：
將200 µL H ₂ O或1x PBS緩沖液加到L-乳酸標準溶液（組分D）的小瓶中，制成100 mM L-乳酸標準溶液。

向990 µL PBS緩沖液中加入10 µL L-乳酸原液，以生成1 mM L-乳酸標準溶液（Lac7）。取1 mM L-乳酸標準溶液并進行1：3連續(xù)稀釋，以獲得L-乳酸標準溶液（Lac6- Lac1）的連續(xù)稀釋液。注意：稀釋的L-乳酸標準溶液不穩(wěn)定，應(yīng)在4小時內(nèi)使用。

準備工作溶液

將5 mL測定緩沖液（組分B）添加到一瓶酶探針（組分A）中。將50 µL NAD儲備溶液（100X）加入組分A的瓶子中，并充分混合。注意：此L-乳酸鹽工作溶液不穩(wěn)定，應(yīng)立即使用。