纖維素酶R-10(Cellulase R-10,CAS NO. 9012-54-8),也稱為Cellulase "Onozuka" R-10,來源于綠色木霉(Trichoderma viride)。纖維素酶R-10是一種酶混合物,包括纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶和蛋白酶。通常與離析酶R-10(Macerozyme R-10)聯(lián)合使用降解植物細(xì)胞壁以制備原生質(zhì)體。
本品以凍干粉形式提供,含>10,000 U/g纖維素酶活性。一個活力單位的纖維素酶能夠降解羧甲基纖維素釋放1 µmole葡萄糖。纖維素酶活性可能被糖類化合物如葡萄糖或纖維二糖所抑制。
酶溶液的制備
【注意】:以下酶溶液的制備體系包括酶的使用濃度僅作為參考,用戶可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)條件或參考文獻(xiàn)來做調(diào)整。
1–1.5% 纖維素酶R-10(0.1-0.15 g/10ml) |
0.2–0.4% 離析酶R-10(0.02-0.04 g/10ml) |
0.4M ganluchun(0.8M ganluchun儲存液) |
20mM KCl(2M KCl儲存液) |
20mM MES, pH 5.7(0.2M MES, pH 5.7儲存液) |
于55℃加熱上述酶溶液10min(目的是為了失活蛋白酶并提高酶溶解性),冷卻至室溫后再加入: |
10mM CaCl2(1M CaCl2儲存液) 5mM β-Mercaptoethanol (β-ME)(可選) |
0.1% BSA(10% BSA儲存液,無菌)(可選) |
配制好的酶溶液是透明的,可用低吸附的0.45μm濾膜過濾后,酶溶液(pH 5-7)于2-8℃穩(wěn)定保存24h。建議根據(jù)實(shí)際需要來配置酶溶液,并盡快用完。 |
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注意事項(xiàng)
本品來自日本國株式會社Yakult本社(YAKULT HONSHA CO., LTD)生產(chǎn)。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。