產(chǎn)品簡介：

Rapamycin（雷帕霉素），又稱為Sirolimus和AY22989，是一種抗真菌和免疫抑制劑，特異性抑制mTOR蛋白（IC50約為0.1 nM）。Rapamycin與細胞內(nèi)受體FKBP-12結(jié)合形成復(fù)合物后，直接作用于mTOR中的FRB（FKBP-12-rapamycin binding）結(jié)構(gòu)域從而抑制蛋白活性。Rapamycin選擇性抑制IL-2誘導(dǎo)的p70 S6激酶磷酸化與功能活化，也可以促使4E-BP1/PHAS1去磷酸，從而加強與eIF4E的結(jié)合并使之失活。Rapamycin能夠阻斷蛋白合成，誘導(dǎo)細胞周期停滯在G1期。不同于FK506和其他免疫抑制劑，Rapamycin以非凋亡的方式阻斷活化T細胞增殖治療器官或骨髓移植中發(fā)生的排斥反應(yīng)，比傳統(tǒng)治療方法副作用更少。

產(chǎn)品性質(zhì)

英文別名（English Synonym）：AY 22989, Sirolimus, RAPA, NSC 226080, Rapamune®

化學名（Chemical Name）：(3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-

9, 10, 12, 13, 14, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 32, 33, 34, 34a-Hexadecahydro-9,27- dihydroxy-3-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hydroxy-3-methoxycyclohexyl]-1-methylethyl]- 10,21-dimethoxy-6,8,12,14,20,26-hexamethyl-23,27-epoxy-3H- pyrido[2,1-c][1,4]oxaazacyclohentriacontine-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-pentone

靶點（Target）：mTOR

CAS 號（CAS NO.）：53123-88-9

分子式（Molecular Formula）：C51H79NO13

分子量（Molecular Weight）：914.17

外觀（Appearance）：白色固體

純度（Purity）：＞99%

溶解性（Solubility）：溶于DMSO(50 mg/ml)，乙醇(50 mg/ml)

運輸與保存方法

冰袋運輸。粉末直接保存于-20 oC，有效期2年。溶于DMSO、乙醇。建議分裝后-20oC避光保存，避免反復(fù)凍存，至少可存放6個月。

相關(guān)產(chǎn)品：

In Vitro：雷帕霉素抑制HEK293細胞內(nèi)源性mTOR活性，IC50為0.1 nM，比iRap和AP21967更有效，IC50分別為5 nM和10 nM [1]。 雷帕霉素通過誘導(dǎo)自噬發(fā)揮其對惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞的抗腫瘤作用，并且表明在惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞中PI3K / Akt信號傳導(dǎo)途徑的破壞可以極大地增強mTOR抑制劑的有效性。 雷帕霉素以劑量依賴性方式抑制所有三種細胞系中的細胞活力，但它們的敏感性變化。 T98G，U87-MG和U373-MG細胞的IC50水平分別為2 nM，1μM和>25μM[3]。

In Vivo：雷帕霉素（i.p，1.5 mg / kg）治療幾乎*可以防止7天和14天跖肌重量和纖維大小的肥大增加[4]。 每天用雷帕霉素（2mg / kg體重，腹膜內(nèi)注射）治療WT或LS / +小鼠4周，然后每周注射相同劑量另外4周。 雷帕霉素處理的LS / +小鼠心臟的異常胎兒基因表達譜顯著逆轉(zhuǎn)[5]。

Kinase Assay：將HEK293細胞以每孔2-2.5×10 5個細胞接種于12孔板中，僅在DMEM中血清饑餓24小時。 將細胞模擬處理或用雷帕霉素（0.05-50nM），iRap（0.5-500nM）或AP21967（0.5-500nM）在37℃處理15分鐘。 在37℃下將血清加至終濃度為20％，持續(xù)30分鐘。 裂解細胞，通過SDS-PAGE分離細胞裂解物。 將分離的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移至PVDF膜，并用針對p70 S6激酶的Thr389的磷酸特異性一抗進行免疫印跡。 使用ImageQuant和KaleidaGraph [1]分析數(shù)據(jù)。

僅供參考。

Cell Assay：HL-60，NB4，U937，KG-1和K562細胞常規(guī)傳代于RPMI-1640中，補充有10％熱滅活的FBS，2 mM L-guanxianan，50 U / mLqingmeisu和50μg/ mLlianmeisu。 在37°C下，5％CO2加濕的氣氛。 對于實驗，通過離心收獲指數(shù)生長的細胞，并重懸于含有10％FBS的新鮮培養(yǎng)基中。 在各種濃度的DMSO或1μMATRA存在下，在BD Falcon六孔板中以2×10 5 / mL的初始細胞密度接種細胞。 在分化劑之前20分鐘加入雷帕霉素（20nM）。 在第2天，向每個孔中加入0.3mL新鮮培養(yǎng)基。 通過臺盼藍排除法測定活細胞，并使用血細胞計數(shù)器進行定量[2]。

僅供參考。

Animal Administration：大鼠[4]

將雌性Sprague-Dawley大鼠（250-275g），成年雌性SD大鼠（225-250g）隨機分配至治療組或媒介物組，使得每組的平均起始體重相等。藥物治療開始于手術(shù)當天或14天停藥后重新加載的*天。雷帕霉素每天一次通過腹膜內(nèi)注射以1.5mg / kg的劑量遞送，溶解在2％羧甲基纖維素中。 CsA每天一次通過皮下注射以15mg / kg的劑量遞送，溶于10％甲醇和橄欖油中。 FK506每天一次通過皮下注射以3mg / kg的劑量遞送，溶于10％乙醇，10％的cremophor和鹽水中。

小鼠[5]

將雷帕霉素以20mg / mL的濃度溶解在乙醇中，過濾滅菌，以1mg / mL的濃度重懸浮于載體（0.25％PEG，0.25％吐溫-80）中，并腹膜內(nèi)注射。 （2mg / kg體重），每天持續(xù)4周或每天持續(xù)4周，然后每周注射另外4周。注射開始于8周（肥大發(fā)作前）或12周（指示確定肥大后），并在治療4周后或治療8周后評估小鼠，詳見結(jié)果和圖例。 。作為對照，WT和LS / +小鼠僅用載體處理。