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鎮(zhèn)江博研生物科技有限公司
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angiostatin
生產(chǎn)商
上海市
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更新時間：2021-07-28 11:36:50瀏覽次數(shù)：153次
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酶標(biāo)板可以拆卸，分幾次用，如果設(shè)立雙標(biāo)準(zhǔn)，可以做三次；如果設(shè)定單標(biāo)準(zhǔn)，可以做6次
標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合的四種：對數(shù)，指數(shù)，二次函數(shù)和直線
試劑盒應(yīng)用用于：實驗室研究使用。
實驗儀器：酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、離心機(jī)、培養(yǎng)箱等
試劑盒檢測：操作簡單、快速、敏感性高、特異性強
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發(fā)貨：現(xiàn)貨
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人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白ELISA試劑盒 做ELISA的經(jīng)驗總結(jié)：
1、包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識破，所以保存抗原很重要，做重組蛋白時，一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。
2、包被液的選擇，一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩沖液，但有時由于試驗的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖液來包。應(yīng)注意以下原理：由于蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用，這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響，大分子蛋白質(zhì)部較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，骨更易吸附到固相載體表面。
3、封閉：繼包被之后用高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)溶液再包被的過程。封閉就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙，從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的在吸附。常用封閉劑有0.05%-0.5%的BSA；10%的小牛血清或1%明膠；脫脂奶粉，比較廉價，可以高濃度使用（5%-10%）；還有一些稀有用到的各種動物血清（主要為了排除相似蛋白干擾）和酪蛋白等等。但終選用什么，要依據(jù)試驗具體來實踐。
4、洗滌板：可以說是ELISA操作中，洗滌是主要的關(guān)鍵技術(shù)。因為聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，為達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的，清除殘留在板孔中游離的物質(zhì)，以及非特異性的吸附的干擾物質(zhì)，在洗滌時又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。所以在洗板時會有一定誤差，人為因素很大（當(dāng)然有條件的用洗板機(jī)除外），洗的不徹底或串了孔，對如此靈敏的ELISA系統(tǒng)可是不小的影響。
5、加抗體標(biāo)本（和二抗）：注意該換槍頭時換槍頭。標(biāo)本稀釋一般可用pbs稀釋，也可用封閉液去稀釋。如需加二抗，還要注意二抗的工作濃度，太高浪費，太低則著色淺。
6、顯色：顯色系統(tǒng)有很多，我們一開始的時候，要選擇適宜的顯色系統(tǒng)。注意顯色系統(tǒng)酶活性底物的保存HRP結(jié)合物加硫柳泵，AP結(jié)合物可加疊氮鈉。
7、每次做盡量要把陰陽空三個對照做好，如出現(xiàn)問題也好分析。
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