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技術(shù)文章

關(guān)于PCR實(shí)驗(yàn)室的介紹

閱讀:56          發(fā)布時(shí)間:2022-12-8

     PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)的簡稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng),能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量,其精確度高達(dá)納米級(jí)別。
PCR技術(shù)能夠精確檢測病毒在患者體內(nèi)存在的數(shù)量、是否復(fù)制、是否傳染、傳染性有多強(qiáng)、幫助醫(yī)生判斷病人是否必要服藥、使用哪類抗病物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗(yàn)依據(jù)。
 
      PCR實(shí)驗(yàn)室原則上分為四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域:試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。為避免交叉污染,進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向原則,即只能從試劑準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū),不得逆向流動(dòng),并且各區(qū)獨(dú)立,如為一個(gè)區(qū)套一個(gè)區(qū)的模式,區(qū)間不能直通,則必須建有緩沖間,保證兩個(gè)區(qū)域間始終處于隔離狀態(tài)。
 
1、試劑準(zhǔn)備區(qū)
 
擴(kuò)增試劑的配制,分裝和保存,本區(qū)氣壓應(yīng)保持微正壓。主要設(shè)備有一級(jí)超純水儀、天平、冰箱、離心機(jī)、加樣器、振蕩器、紫外燈。
 
2、標(biāo)本制備區(qū)
 
實(shí)驗(yàn)室樣品的混樣和測試樣品的制備。工作區(qū)域?yàn)樨?fù)壓或減壓,安裝排風(fēng)系統(tǒng)。主要設(shè)備有冰箱、生物安全柜、離心機(jī)、加樣器、振蕩器、恒溫水浴、紫外燈。
 
3、擴(kuò)增區(qū)
 
PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系的配制和模板的加入,核酸擴(kuò)增。工作區(qū)域?yàn)樨?fù)壓或減壓,安裝排風(fēng)系統(tǒng)。主要設(shè)備有核酸擴(kuò)增設(shè)備、冰箱、潔凈工作臺(tái)、污水處理設(shè)備、離心機(jī)、加樣器、紫外燈。
 
4、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)
 
擴(kuò)增產(chǎn)物的測定。工作區(qū)為負(fù)壓,安裝排風(fēng)系統(tǒng)。使用儀器有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器和水浴箱等。
 

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