| 上海宇淳生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： PCR八聯(lián)排管,sigma現(xiàn)貨,Cy7試劑 |
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| 參考價 | ￥620-￥1060 |
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型號
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
| 24T | 620元 | 1 盒 可售 |
| 48T | 1060元 | 1 盒 可售 |
更新時間：2024-06-06 10:40:29瀏覽次數(shù)：257
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外切葡聚糖酶纖維二糖水解酶(CBH)試劑盒
外切葡聚糖酶纖維二糖水解酶(CBH)試劑盒
本試劑盒僅供科研使用 1 土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶（S-CBH）活性測定試劑盒說明書 (貨號:WS3230F 分光法 48 樣) 一、產(chǎn)品簡介： 土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶又稱土壤纖維二糖水解酶（CBH，EC 3.2.1.91）是土壤纖維素 酶系的組份之一，該酶作用于β-1,4-糖苷鍵，每次切下一個纖維二糖（還原糖）分子，本 試劑盒采用該酶催化對硝基苯基-β-D-纖維二糖苷生成黃色物質(zhì)對-硝基*酚（PNP），該物 質(zhì)在 405nm 有特征光吸收，進而得到土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶（S-CBH）活性大小。 二、試劑盒組分與配制： 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 90mL×1 瓶 4℃保存 試劑二 粉體 mg×2 支 4℃保存 臨用前每支加入 1.5mL 蒸餾水 溶解，4 度保存。 試劑三 液體 20mL×1 瓶 4℃保存 標準品 粉劑 mg×1 支 4℃保存 若重新做標曲，則用到該試劑。 三、所需儀器和用品： 可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、水浴鍋或恒溫振蕩培養(yǎng)箱、可調(diào)式 移液器、蒸餾水。 四、土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶活性測定： 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗 樣本和試劑浪費！ 1、樣本制備： 取新鮮土樣或干土（風干或者 37 度烘箱風干），先粗研磨，過 40 目篩網(wǎng)備用。 【注】：土壤風干，減少土壤中水分對于實驗的干擾；土壤過篩，保證取樣的均勻細膩； 2、上機檢測： ① 可見分光光度計預熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 405nm，蒸餾水調(diào)零。 ② 在 EP 管中依次加入： 試劑名稱（μL） 測定管 對照管 空白管（僅做一次） 土樣（g） 0.1 0.1 試劑一 750 800 750 試劑二 50 50 充分混勻，37℃培養(yǎng) 2 小時（振蕩培養(yǎng)或間隔 20min 手動振蕩混勻 幾下） 試劑三 200 200 200 混勻，8000rpm 離心 5min（若上清液不澄清可加大離心力），取 700μL 上清液至 1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）中，405nm 下讀取 吸光值 A，△A=A 測定- A 對照-A 空白（每個樣本做一個自身對照）。 【注】：1.若ΔA 較小，可延長 37℃的孵育時間 T（如增至 4 小時或更長），或增加土樣質(zhì) 量 W（如增至 0.3g）。則改變后的 T 和 W 需代入計算公式重新計算。 2.若測定管 A 值大于 1.5 或△A 大于 1.5，可縮短 37℃的孵育時間 T（如減至 0.5 小時或更 短），或減少土樣質(zhì)量 W（如減至 0.05g）。則改變后 T 和 W 需代入計算公式重新計算。 或?qū)ψ詈笠徊降拇龣z測上清液（包括測定管、對照管和空白管）同時用蒸餾水進行稀釋，本試劑盒僅供科研使用 2 稀釋倍數(shù) D 代入計算公式。 五、結(jié)果計算： 1、標準曲線方程：y = 0.0141x + 0.0157；x 為標準品摩爾質(zhì)量（nmol），y 為△A。 2、單位定義：每小時每克土樣中產(chǎn)生 1nmol 對-硝基*酚（PNP）定義為一個酶活單位。 S-CBH 活力(nmol/h/g 土樣)=(ΔA-0.0157)÷0.0141÷W÷T×D =35.5×(ΔA-0.0157)÷W×D T---反應時間，2h； W---土壤樣本實際取樣量，g； PNP 相對分子質(zhì)量---139.11； D---稀釋倍數(shù)，未稀釋即為 1。 附：標準曲線制作過程： 1 制備標準品母液（10μmol/mL）：向標準品 EP 管里面加入 1.4mL 蒸餾水超聲溶解。 2 把母液用蒸餾水稀釋成以下濃度：0, 0.4, 0.8, 1.2, 1.6, 2μmol/mL。也可根據(jù)實際樣本 來調(diào)整標準品濃度。 3 在 EP 管加入：50μL 標準品+750μL 試劑一+200μL 試劑三，混勻，取 200μL 至 96 孔板中，于 405nm 下讀取吸光值，根據(jù)結(jié)果制作標準曲線。
