上海宇淳生物科技有限公司
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外泌體相關(guān)技術(shù)服務(wù)
2023-9-26 閱讀(509)
外泌體相關(guān)技術(shù)服務(wù)平臺(tái)介紹
外泌體(Exosome)是直徑約為 30-150nm,密度在 1.13-1.21g/ml 的小囊泡。Exosome 天 然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液和母乳,是活細(xì)胞分泌的來(lái)源于晚期核內(nèi)體(也稱 為多囊泡體 )的膜性囊泡。 研究發(fā)現(xiàn),Exosome 內(nèi)含有與細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的蛋白質(zhì) rRNA 和 microRNA,并且 exosome 能夠通過(guò)生物屏障,在細(xì)胞間傳遞功能性核酸分子,從而發(fā)揮各種生物學(xué)功能。 一、外泌體分離提取服務(wù): 本公司可提供差速超速離心法和試劑盒法分離外泌體??煞蛛x細(xì)胞上清、血液、腦 脊液、肺泡灌洗液、尿液、膽汁、腹水、唾液、羊水以及動(dòng)植物組織樣本來(lái)源的外泌體。2 種分離方法特點(diǎn)如下: 差速超速離心法:最*用的外泌體純化方法。差速超速離心法操作簡(jiǎn)便,所獲得的囊泡 純度高、雜質(zhì)少。但所需樣品較多,產(chǎn)率低于試劑盒法。自有平臺(tái),快速高效,隨時(shí)預(yù)約, 周期一般 1-3 個(gè)工作日。 試劑盒法:操作簡(jiǎn)便,外泌體產(chǎn)率高,所需要的樣品體積較少。 低溫超速離心機(jī) Thermo WX100二、外泌體電鏡鑒定技術(shù)服務(wù): 2.1、電鏡下,外泌體多為茶托形或一側(cè)凹陷的半球形。想要獲得比較好的電鏡數(shù)據(jù), 除高質(zhì)量外泌體樣品外,按樣品摸索合適的上機(jī)條件后盡快制樣上機(jī)。自有的電鏡平臺(tái),專 業(yè)提供外泌體電鏡鑒定技術(shù)服務(wù)。電鏡平臺(tái)搭載真實(shí) 2000 萬(wàn)像素的 coms 相機(jī),感光度更 高,照片清晰度大大超出常規(guī)電鏡。結(jié)合本公司 NTA 測(cè)試平臺(tái),可以更好的把握樣品濃度 及上機(jī)條件。多年來(lái),已經(jīng)拍攝過(guò)數(shù)千例各種來(lái)源的外泌體樣品。質(zhì)量及周期均可靠,受到 廣大客戶一*好評(píng)! JEOL 品牌 JEM 1400 型透射電鏡2.2、外泌體免疫電鏡技術(shù)服務(wù) 在透射電鏡基礎(chǔ)上,對(duì)外泌體標(biāo)志蛋白進(jìn)行免疫標(biāo)記,利用膠體金標(biāo)記出外泌 體標(biāo)志蛋白的空間位置,結(jié)合了透射電鏡表征和免疫學(xué)原理。這樣數(shù)據(jù)結(jié)果既 可以獲得經(jīng)典形態(tài)的外泌體形態(tài),又可以定性及定位外泌體表面的標(biāo)志蛋白。 可以作為文章的加分項(xiàng)!三、外泌體粒徑檢測(cè)技術(shù)服務(wù): 平臺(tái)提供外泌體濃度及粒徑檢測(cè)技術(shù)服務(wù),平臺(tái)采用德國(guó) Particle Metrix 公司的 ZetaView 粒度儀,可對(duì)樣品進(jìn)行高質(zhì)高效檢測(cè)。 外泌體樣品有其特殊性,4℃下,會(huì)逐漸降解并失去生物活性。所以,我司 NTA 檢測(cè)平 臺(tái)嚴(yán)格要求檢測(cè)時(shí)間,到樣 1-2 個(gè)工作日出具檢測(cè)報(bào)告。確保準(zhǔn)確性及時(shí)效性。有特殊要求 的客戶可加急處理,最快當(dāng)天到樣,當(dāng)天檢測(cè),當(dāng)天即可出具報(bào)告! 德國(guó) Particle Metrix 公司的 ZetaView 粒度儀 四、外泌體 WB 鑒定服務(wù): 外泌體陽(yáng)性指標(biāo)主要包括:CD9,CD63,CD81,TSG101,syntenin。陰性對(duì)照指標(biāo)為:Calnexin (內(nèi) 質(zhì)網(wǎng)蛋白)。常規(guī)選擇 2 個(gè)陽(yáng)性和 1 個(gè)陰性指標(biāo)。公司提供上述指標(biāo)對(duì)應(yīng)一抗及二抗,特殊抗 體需由客戶自己提供。實(shí)際操作中,陽(yáng)性蛋白分子量并不固定,以實(shí)際情況為準(zhǔn)。另外,外泌體 WB 檢測(cè)有其特殊性,部分指標(biāo)可能不出,或表達(dá)量很高。做出*美條帶可能需要反復(fù)調(diào)試濃度。 我們會(huì)保留對(duì)應(yīng)原始數(shù)據(jù)照片及轉(zhuǎn)膜圖片,不保證 WB 實(shí)驗(yàn)成功,且需要按實(shí)際操作次數(shù)收費(fèi)。 五、外泌體檢測(cè)服務(wù)-QPCR 檢測(cè) 檢測(cè)范圍包括:mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA、DNA 等六、外泌體共孵育實(shí)驗(yàn) 1、實(shí)驗(yàn)介紹 外泌體與細(xì)胞共孵育培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞可以通過(guò)胞吞過(guò)程吞噬外泌體,外泌體包裹的核酸、蛋白質(zhì) 及其他分子會(huì)釋放出來(lái),從而影響細(xì)胞的功能變化。外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類 型,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、腫瘤侵襲等方方面面。 2、實(shí)驗(yàn)流程 外泌體提取和純化外泌體濃度測(cè)定 外泌體熒光標(biāo)記(PKH67/PKH26 染色) 熒光外泌體純化 熒光外泌體濃度標(biāo)記 外泌體-細(xì)胞共孵育培養(yǎng)實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞功能學(xué)檢測(cè)(周期、凋亡、克隆形成、侵襲、轉(zhuǎn)移等)細(xì)胞基因表達(dá)檢測(cè)(qPCR、Western blot、Elisa 檢測(cè)等) 八、外泌體 MicroRNA 測(cè)序及蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)服務(wù) 平臺(tái)有著多年的二代、三代測(cè)序 及蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù)經(jīng)驗(yàn)。相關(guān)的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)及服務(wù)經(jīng)驗(yàn)豐富,團(tuán)隊(duì)技 術(shù)實(shí)力雄厚,合作開展相關(guān)業(yè)務(wù)。1、外泌體MicroRNA 測(cè)序 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:外泌體提取、純化建庫(kù)+全轉(zhuǎn)錄組測(cè)序基礎(chǔ)數(shù)據(jù)分析 升級(jí)服務(wù):高級(jí)數(shù)據(jù)分析 2、外泌體蛋白組學(xué)技術(shù)服務(wù) 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:外泌體總蛋白提取,labelfree 非定量質(zhì)譜檢測(cè)蛋白組學(xué); 升級(jí)服務(wù):質(zhì)譜個(gè)性化分析