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閱讀:424發(fā)布時間:2019-4-11
想要試驗成果自然少不了ELISA試劑盒操作條件,我司業(yè)務(wù)錢司理整理了一份關(guān)于ELISA試劑盒操作條件,快來看看吧。
ELISA試劑盒操作過程
ELISA試劑盒運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)作大量的泡沫,以免加樣時參與大量的氣泡,發(fā)作加樣上的過失。依據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自己的數(shù)量來定,能運用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參與50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
參與稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、參與待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即參與50ul的*符號的抗體。蓋上膜板,悄悄振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振蕩30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
每孔參與80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振蕩30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。ELISA試劑盒重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
每孔參與底物A、B各50ul,悄悄振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
取出酶標(biāo)板,敏捷參與50ul停止液,參與停止液后應(yīng)立即測定成果。
在450nm波利益測定各孔的OD值。
依據(jù)ELISA試劑盒試劑的來歷和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可規(guī)劃出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法
(二)雙位點一步法
(三)間接法測抗體
(四)競爭法
(五)捕獲法測IgM抗體
(六)使用親和素和*
ELISA試劑盒廣泛用作非放射性同位素的成鍵化驗. 在這種方法中, 一般標(biāo)準(zhǔn)配體是固定的, 經(jīng)過參與溶液相受體或蛋白質(zhì)來使之成鍵. ELISA試劑盒經(jīng)過參與與受體特異性反應(yīng)的抗體來定量成鍵的受體, 而且*初抗體的量以參與第二種能顯色的抗體丈量. 第二種抗體能識別抗體的結(jié)尾, 在其結(jié)尾的堿性磷酸酯或過氧化物酶等與酶發(fā)作反應(yīng), 從而使溶液顯色.
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