今天氣候晴朗，一掃前幾天陰雨氣候，暖暖的太陽讓這傳自西方的白se情人節(jié)更顯溫馨，上海通蔚生物有限公司給我們帶來夸姣的節(jié)日祝愿。下面咱們言歸正題，跟我們介紹ELISA試劑盒組份和操作過程。ELISA中有三個必要的試劑：免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等。
完整的ELISA試劑盒包括以下各組分：
(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)
(2)酶標記的抗原或抗體(結(jié)合物)；
(3)酶的底物；
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考規(guī)范品和控制血清(定量測定中)；
(5)結(jié)合物及標本的稀釋液；
(6)洗滌液
(7)酶反應停止液。
ELISA試劑盒操作過程：
1. 加規(guī)范品：在酶標包被板上設規(guī)范品孔，順次參加不同濃度的規(guī)范品50ul(建議每個濃度做2個平行孔)
2. 加樣：別離設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其他各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl，
然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，悄悄晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5. 洗滌：當心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：除空白孔外每孔參加酶標試劑50μl。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先參加顯色劑A50μl，再參加顯色劑B50μl，悄悄震動混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 停止：每孔加停止液50μl，停止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加停止液后15分鐘以內(nèi)進行。
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