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植物葉綠體純化試劑盒

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更新時(shí)間：2018-06-19 14:32:58瀏覽次數(shù)：439次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

植物葉綠體純化試劑盒葉綠體是重要的，負(fù)責(zé)植物光合作用的細(xì)胞器，很多重要的特性（如雄性不育）也跟葉綠體相關(guān)，所以葉綠體是研究植物生理和母系遺傳的重要材料。對(duì)植物葉綠體進(jìn)行生化，遺傳和分子生物學(xué)研究都需要進(jìn)行葉綠體純化。本產(chǎn)品就是基于密度梯度離心的，專(zhuān)門(mén)用于從植物葉片中純化完整葉綠體的試劑盒。它具有下列特點(diǎn)：

詳細(xì)介紹

 

植物葉綠體純化試劑盒

名稱(chēng)

規(guī)格

價(jià)格

手冊(cè)

植物葉綠體純化試劑盒

15次

890元

 

葉綠體是重要的，負(fù)責(zé)植物光合作用的細(xì)胞器，很多重要的特性(如雄性不育)也跟葉綠體相關(guān)，所以葉綠體是研究植物生理和母系遺傳的重要材料。對(duì)植物葉綠體進(jìn)行生化，遺傳和分子生物學(xué)研究都需要進(jìn)行葉綠體純化。本產(chǎn)品就是基于密度梯度離心的，專(zhuān)門(mén)用于從植物葉片中純化完整葉綠體的試劑盒。它具有下列特點(diǎn)：                                                                 
1.   即用型試劑盒，用戶(hù)不需要單獨(dú)配制各種溶液。
2.   提供A、B兩種選擇，A型用于葉綠體粗提，B型用于葉綠體精提，
3.   粗提葉綠體可用于后續(xù)的SDS-PAGE，Western，ELSIA和蛋白組分析。
4.   精提所得葉綠體完整，可用于后續(xù)的光合作用，電子鏈和磷酸化，跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，  
      體外葉綠體蛋白合成，蛋白定位等研究。 還可用于葉綠體膜，基質(zhì)，類(lèi)
      囊體，葉綠體DNA和葉綠體RNA純化。
5.   本產(chǎn)品足夠15次提取，每次可處理30g葉片，能得到5 mg左右葉綠體。
6.   已經(jīng)成功用于菠菜，大豆，萵筍，白菜，煙草和甜菜等植物，還可用于更多植
      物（可能需要優(yōu)化條件）。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開(kāi)。水相層(無(wú)色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過(guò)離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
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