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更新時間:2018-06-15 15:42:14瀏覽次數(shù):453次
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鹽酸胍溶液,8M本產(chǎn)品為即用型鹽酸胍溶液。可快速簡易的制備8M以下的任意濃度,無需花費更多寶貴的實驗時間處理難以稱量的晶體緩慢制備鹽酸胍溶液,本產(chǎn)品不含225-300nm處具有紫外吸收的物質(zhì),不含醛類,具有*的穩(wěn)定性,無顆粒物,是一種透明似水晶的溶液。經(jīng)檢測,本產(chǎn)品具有鮮明的紫外截斷光譜,OD260小于0.03;典型的金屬含量:銅<0.02ppm,鋅<0.15ppm,鐵<0.25ppm,鉛<0.
鹽酸胍溶液,8M
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
鹽酸胍溶液,8M | 250mL | 220元 |
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本產(chǎn)品為即用型鹽酸胍溶液。可快速簡易的制備8M以下的任意濃度,無需花費更多寶貴的實驗時間處理難以稱量的晶體緩慢制備鹽酸胍溶液,本產(chǎn)品不含225-300nm處具有紫外吸收的物質(zhì),不含醛類,具有*的穩(wěn)定性,無顆粒物,是一種透明似水晶的溶液。經(jīng)檢測,本產(chǎn)品具有鮮明的紫外截斷光譜,OD260小于0.03;典型的金屬含量:銅<0.02ppm,鋅<0.15ppm,鐵<0.25ppm,鉛<0.005ppm。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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