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上海聯邁生物工程有限公司
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包涵體中量純化試劑盒本產品是LMAI Bio包涵體微量純化試劑盒(CAT#:90508)的中量提取升級產品,用于中量,快速的提取高質量的包涵體。它具有下列特點:
1. 中量提取,一次可以處理30-50 mL的菌液,一次中量提取相當于10-20次微量提取。
2. 操作簡單快速,整個過程只要四十分鐘左右。
3. 大規(guī)模提取,可以在15-50 mL離心管中完成。
包涵體中量純化試劑盒
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
包涵體中量純化試劑盒 | 5次 | 1900元 |
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本產品是LMAI Bio包涵體微量純化試劑盒(CAT#:90508)的中量提取升級產品,用于中量,快速的提取高質量的包涵體。它具有下列特點:
1. 中量提取,一次可以處理30-50 mL的菌液,一次中量提取相當于10-20次微量提取。
2. 操作簡單快速,整個過程只要四十分鐘左右。
3. 大規(guī)模提取,可以在15-50 mL離心管中完成。
4. 能有效去除包涵體中的細胞壁和細胞膜等非重組蛋白成份,使重組蛋白所占比重達到60%以上。
5. 細胞裂解通過非離子洗滌劑的化學裂解法,裂解更加溫和。
6. 得到的包涵體可以用于重折疊。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節(jié)其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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