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非凍型細(xì)菌RNA保存液

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更新時間:2018-06-07 16:20:36瀏覽次數(shù):280次

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產(chǎn)品簡介

非凍型細(xì)菌RNA保存液用傳統(tǒng)的RNA提取方法提取到的細(xì)菌RNA樣品用于細(xì)菌基因表達(dá)譜研究時,不可避免地會遇到的一個問題,即得到的RNA材料并不能準(zhǔn)確反映取樣時細(xì)菌RNA的真實表達(dá)水平,原因之一是細(xì)菌RNA的半衰期非常短,一般只有幾分鐘,哪怕是經(jīng)過短暫的離心棄培養(yǎng)基處理過程,細(xì)菌的RNA水平都會發(fā)生明顯改變。另一原因是細(xì)菌對環(huán)境因素的改變非常敏感,溫度、密度、離心力等條件的改變都會導(dǎo)致細(xì)菌基因表達(dá)的

詳細(xì)介紹

 

非凍型細(xì)菌RNA保存液

名稱

規(guī)格

價格

手冊

非凍型細(xì)菌RNA保存液

100mL

490元

 

用傳統(tǒng)的RNA提取方法提取到的細(xì)菌RNA樣品用于細(xì)菌基因表達(dá)譜研究時,不可避免地會遇到的一個問題,即得到的RNA材料并不能準(zhǔn)確反映取樣時細(xì)菌RNA的真實表達(dá)水平,原因之一是細(xì)菌RNA的半衰期非常短,一般只有幾分鐘,哪怕是經(jīng)過短暫的離心棄培養(yǎng)基處理過程,細(xì)菌的RNA水平都會發(fā)生明顯改變。另一原因是細(xì)菌對環(huán)境因素的改變非常敏感,溫度、密度、離心力等條件的改變都會導(dǎo)致細(xì)菌基因表達(dá)的迅速改變。上述兩因素的疊加就會使實際得到的RNA表達(dá)譜與真實的RNA表達(dá)譜之間存在巨大的誤差,所以傳統(tǒng)的處理方法不適合于細(xì)菌RNA表達(dá)譜研究。為解決此問題,本公司特推出本產(chǎn)品,它具有下列特點。
1. 能快速滲透到液體培養(yǎng)基中的細(xì)菌內(nèi),抑制RNA分子的降解或表達(dá)譜的改變。
2. 操作簡單,直接將本產(chǎn)品和液體樣品按比例混合即可。
3. 適用于各種細(xì)菌(包括革氏陽性和革氏陰性),也適用于其他微生物樣品,如真菌和藻類等。
4. 重復(fù)性好,效果跟進(jìn)口同類產(chǎn)品相當(dāng)。
5. 處理的樣品可直接用于總RNA提取,也可以長期保存。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表:
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