BL21-AI™ One Shot™ 化學感受態(tài)大腸桿菌
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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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更新時間:2018-05-25 15:45:23瀏覽次數(shù):449次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線INS-1大鼠胰島細胞瘤細胞該細胞源自X射線照射的移植胰島瘤的大鼠,胰島素陽性,可合成胰島素原I和II,可用于beta細胞功能研究。
英文名稱:Rat Pancreatic Islet Cell Tumor Cells
1)來源:大鼠移植胰島瘤
2)形態(tài):貼壁生長
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
INS-1大鼠胰島細胞瘤細胞
英文名稱:Rat Pancreatic Islet Cell Tumor Cells
規(guī)格:1*10 6
細胞介紹
該細胞源自X射線照射的移植胰島瘤的大鼠,胰島素陽性,可合成胰島素原I和II,可用于beta細胞功能研究。
一、細胞特性
1)來源:大鼠移植胰島瘤
2)形態(tài):貼壁生長
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細胞收到后處理
INS-1大鼠胰島細胞瘤細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養(yǎng)液,懸浮細胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
三、細胞培養(yǎng)步驟
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中,加入約6ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集,1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心5分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標準是什么?
(1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
★ 注:如運輸過程中導致細胞污染或者死亡,我們將無條件補發(fā) 收貨后十個工作日內有其他問題提供照片可半價重發(fā)。
相關細胞系列表:
Human/人 人乳腺癌細胞;HS 578T
Human/人 人乳腺癌細胞;Hs 343.T
Human/人 人黑色素瘤細胞;Hs 294T
Human/人 人乳腺癌細胞;Hs 281.T
Human/人 人乳腺癌細胞;Hs 274.T
Human/人 人肺微血管內皮細胞;HPMEC
Human/人 人胰腺正常導管上皮細胞;HPDE6
Human/人 人肺動脈平滑肌細胞;HPASMC
Human/人 人皮下脂肪細胞;HPA-s
Human/人 人胰腺癌細胞;HPAF-II
Human/人 人肺動脈內皮細胞;HPAEC
Human/人 人胰腺癌細胞;HPAC
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