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NCI-H3255人肺癌細(xì)胞

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所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2018-05-22 09:32:28瀏覽次數(shù):204次

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所在地區(qū):上海上海市

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

NCI-H3255人肺癌細(xì)胞(STR鑒定)
英文名稱:Human Lung Cancer Cells
1) 來(lái)源:肺癌
2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長(zhǎng)
3) 含量:>1x106 個(gè)/mL
4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

詳細(xì)介紹

NCI-H3255人肺癌細(xì)胞
英文名稱:Human Lung Cancer Cells
規(guī)格:1*10 6  
細(xì)胞介紹
一、細(xì)胞特性
1) 來(lái)源:肺癌
2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長(zhǎng)
3) 含量:>1x106 個(gè)/mL
4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細(xì)胞收到后處理
NCI-H3255人肺癌細(xì)胞
在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后,先打開(kāi)外包裝,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作。鏡下觀察:未超過(guò)80%匯合度時(shí),可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養(yǎng)液,懸浮細(xì)胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
三、細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中,加入約6ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集,1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,進(jìn)行離心收集,1000RPM條件下離心5分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現(xiàn)問(wèn)題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?
(1)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);

  1. 凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
  2. 存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
  3. 凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
  4. 視具體情況而定。

 ★ 注:如運(yùn)輸過(guò)程中導(dǎo)致細(xì)胞污染或者死亡,我們將無(wú)條件補(bǔ)發(fā) 收貨后十個(gè)工作日內(nèi)有其他問(wèn)題提供照片可半價(jià)重發(fā)。

相關(guān)細(xì)胞系列表:

EL4 小鼠淋巴瘤細(xì)胞 小鼠源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml HepG2細(xì)胞

Hepa 1-6 小鼠肝癌細(xì)胞 小鼠源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml HepG2.2.15細(xì)胞

HCC94 人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化) 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml HepG2/C3A細(xì)胞

HCT-8 人回盲腸癌細(xì)胞 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml hFOB 1.19細(xì)胞

HEL 人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml HGC-27細(xì)胞

HT-29 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml HIC細(xì)胞

MG-63 人骨肉瘤細(xì)胞 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml HK-2細(xì)胞

人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml 999 HL-60細(xì)胞

SP2/0 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 小鼠源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml HMy2.CIR細(xì)胞

TE-1人食管癌細(xì)胞 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml HPAC細(xì)胞

關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱 顯微鏡

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