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酶標(biāo)儀在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用

2013年11月13日 09:30:25人氣:3261來(lái)源:西安越濤創(chuàng)先電子科技有限公司

  hbzhan內(nèi)容導(dǎo)讀:酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀,是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的儀器??珊?jiǎn)單地分為半自動(dòng)和全自動(dòng)2大類(lèi),但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個(gè)比色計(jì),即用比色法來(lái)分析抗原或抗體的含量。ELISA測(cè)定一般要求測(cè)試液的zui終體積在250ul以下,用一般光電比色計(jì)無(wú)法完成測(cè)試,因此對(duì)酶標(biāo)儀中的光電比色計(jì)有特殊要求。
  
  目前在國(guó)內(nèi)血站臨床試驗(yàn)室中,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)已成為zui主要的免疫測(cè)定技術(shù),由于大部分ELISAzui后以比色測(cè)定,使酶標(biāo)儀成其它各類(lèi)型酶標(biāo)儀為ELISA測(cè)定的重要工具。八十年代初,當(dāng)酶免疫測(cè)定技術(shù)從國(guó)外引進(jìn)時(shí),基本上均使用肉眼判斷結(jié)果,難以滿足臨床測(cè)定要求。目前國(guó)內(nèi)醫(yī)院和血站實(shí)驗(yàn)室所使用的酶標(biāo)儀絕大部分為進(jìn)口儀器,品種型號(hào)多達(dá)數(shù)十種。
  
  軟件功能是酶標(biāo)儀所具有的對(duì)ELISA定性和定量測(cè)定及其他測(cè)定方式如酶動(dòng)力學(xué)、紫外、凝集等的統(tǒng)計(jì)分析并報(bào)告結(jié)果的功能,是判斷酶標(biāo)儀質(zhì)量的一個(gè)指標(biāo)。ELISA測(cè)定,酶標(biāo)儀需具有陽(yáng)性判斷值(Cutoff)及測(cè)定灰區(qū)的統(tǒng)計(jì)計(jì)算功能,如血站實(shí)驗(yàn)室篩選獻(xiàn)血員進(jìn)行抗-HCV、HBSAG、抗-HIV測(cè)定時(shí),常遇到測(cè)定吸光度處于Cutoff附近,但又低于Cutoff的樣品,這樣的血輸給患者導(dǎo)致輸血后傳染疾病的可能性增大。若設(shè)定灰區(qū),以灰區(qū)下限作為判斷標(biāo)準(zhǔn),可減少輸血后傳染疾病的可能性。此外四參數(shù)測(cè)定的劑量反應(yīng)曲線適合于定量酶免疫測(cè)定曲線的擬合。因此,如果目的為定量測(cè)定,要有這種曲線回歸方程計(jì)算分析功能。其他如連點(diǎn)、直線等回歸計(jì)算,可根據(jù)酶標(biāo)儀的應(yīng)用目的而定。
  
  丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)的測(cè)定,是對(duì)獻(xiàn)血者*的篩查項(xiàng)目之一。方法上有速率法和賴氏法等。若采用賴氏試管法,費(fèi)工、費(fèi)時(shí),不但從方法上得不到統(tǒng)一,而且不利于計(jì)算機(jī)對(duì)原始數(shù)據(jù)的網(wǎng)絡(luò)化管理。若采用微板酶標(biāo)儀定量(U/L)方法,利用酶標(biāo)儀與計(jì)算機(jī)接口,聯(lián)接血站局域網(wǎng)絡(luò),這就同其他酶法檢測(cè)項(xiàng)目一樣,實(shí)現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)室原始數(shù)據(jù)的計(jì)算機(jī)管理。
  
  采用試管法檢測(cè)Rh血型,操作繁鎖,肉眼判讀結(jié)果缺乏客觀性。故將平底微板法與酶標(biāo)儀掃描,電腦自動(dòng)判讀打印技術(shù)相結(jié)合,用TCEAN全自動(dòng)加樣分析系統(tǒng)完成。經(jīng)常規(guī)13032份標(biāo)本的檢測(cè),符合率達(dá)100%。利用酶標(biāo)儀法檢測(cè)Rh血型具有較好的重復(fù)性、準(zhǔn)確性,操作簡(jiǎn)便快速、判讀結(jié)果客觀可靠,也易于原始結(jié)果的保存,提高自動(dòng)化程度,能的篩選獻(xiàn)血者,有利于實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)化管理,也有利于血站稀有血型庫(kù)的建立。
  
  生長(zhǎng)曲線一般指菌落總數(shù)CFU/mI。或者菌落總數(shù)的對(duì)數(shù)logCFU/ml。隨時(shí)間變化曲線,可用來(lái)展示微生物生長(zhǎng)情況和新陳代謝規(guī)律。由于受試菌數(shù)量/濃度與菌懸液的光學(xué)密度(opticaldensity,OD)值成正比,所以生長(zhǎng)曲線也常用OD-t曲線表示。目前菌懸液OD值主要通過(guò)可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定,其在評(píng)價(jià)微生物生長(zhǎng)狀態(tài)時(shí)可以得到滿意的結(jié)果。但是該方法存在一定缺點(diǎn):即時(shí)性差;需反復(fù)采樣,操作繁瑣;取樣和檢測(cè)過(guò)程中培養(yǎng)基容易感染雜菌;作為懸濁液,細(xì)菌有一定的沉降速率,檢測(cè)時(shí)間的長(zhǎng)短會(huì)對(duì)OD值產(chǎn)生影響,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)再現(xiàn)較為困難[7]。由于酶標(biāo)儀是一種快速、準(zhǔn)確、高通量的儀器,所以我們總會(huì)選擇使用酶標(biāo)儀來(lái)進(jìn)行菌懸液OD值的測(cè)定,來(lái)提高工作效率,節(jié)約時(shí)間。
  
  除測(cè)定菌懸液OD值外,酶標(biāo)儀還可用來(lái)檢測(cè)細(xì)菌濃度。例如:各類(lèi)紡織品與人類(lèi)生活關(guān)系密切,其表面附著的微生物可能是疾病傳播的重要媒介或與體表微生物相伴形成一種有機(jī)的微生態(tài)關(guān)系[8]。隨著時(shí)代的發(fā)展,各種抗菌織物產(chǎn)品不斷出現(xiàn),但對(duì)評(píng)價(jià)抗菌紡織品的
  
  抑菌效果尚無(wú)規(guī)范的方法,所以,建立一種科學(xué)評(píng)價(jià)織品抗菌效果的方法對(duì)衛(wèi)生微生物學(xué)和微生態(tài)學(xué)研究均具有重要價(jià)值。由于活菌計(jì)數(shù)誤差較大而且工作繁瑣,不適用于大批量標(biāo)本的檢測(cè),因而利用酶標(biāo)儀檢測(cè)細(xì)菌濃度便可建立檢測(cè)織品抑菌效果的有效方法。
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