上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種 |
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公司信息
- 聯(lián)系人:
- 劉小姐
- 電話:
- 021-52960952
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- 傳真:
- 021-57690166
- 地址:
- 上海市閔行區(qū)碧泉路36弄銀宵大廈
- 郵編:
- 200000
- 網(wǎng)址:
- www.bhsy-e.com/
參考價 | ¥2990 |
-
型號
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
50T | 2990元 | 15 盒 可售 |
更新時間:2024-01-25 09:50:05瀏覽次數(shù):198
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轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 | 包裝規(guī)格 |
轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因PCR檢測試劑盒 | BJ-P7945 | 50T |
運輸:低溫
保存:-20℃避光
有效期:一年
貨期:2-3周
產(chǎn)品用途:公司產(chǎn)品僅供科研研究實驗
試劑組成:
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品。
2. 根據(jù)保守序列設計的專一性引物。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
操作流程:
RNA 提取 → 反轉(zhuǎn)錄 → 設計引物 → Q-PCR
一、 總RNA提取
A組織樣本:迅速將新鮮的組織切成合適的大小,在液氮中充分研磨后加裂解液裂解,或直接加入裂解液后用勻漿器勻漿。每30-50mg組織加1ml Trizol。
B全血樣品:加入3-5倍體積的紅細胞裂解液到血樣中,室溫孵育10min,室溫3500rpm離心6min。棄上清,原每2-3ml全血樣品加1mL Trizol。
C細胞樣品:懸浮液中生長的細胞,通過離心收集細胞后,每1×105?106細胞加入1mL Trizol,移液器吹打混勻,直接裂解或-80℃儲存一個月。貼壁生長的細胞,有兩種處理方法。一種是移除培養(yǎng)基后,將1mL Trizol直接加入直徑3.5cm的培養(yǎng)皿中裂解細胞?;蚴窍扔脤①N壁細胞消化下來并收集后,再加入1mL Trizol進行裂解。(Note:加入Trizol前, PBS充分洗滌細胞去除殘余培養(yǎng)基。)
二、直接法
1)加入1ml Trizol試劑,混勻,冰上孵育10min。
2)4℃,12000rpm離心10min,小心轉(zhuǎn)移上清液到不含顆粒的新EP管中。
3)加入200ul氯仿,劇烈振蕩15秒,室溫孵育5min。
4)4℃,12000rpm離心15min。混合液分三層,包括最下面的氯仿有機相,中間相和上層水相。小心轉(zhuǎn)移上層水相到新的EP管(大約60%體積的Trizol),不要吸取中間相,可留下少量上層液體?。∟ote:質(zhì)量比數(shù)量更重要?。?/span>
5)加入等體積的異丙醇,輕輕地顛倒混勻約10次,室溫放置10min。
6)4℃,12000rpm離心10min。棄上清,1ml 75%乙醇洗滌RNA沉淀兩次。
7)4℃,12000rpm離心5min,棄上清,室溫下風干5-10min(不要太干,過度干燥會導致RNA難溶解?。NA溶于15μl-50μlDEPC水中。
8)立即進行反轉(zhuǎn)錄反應,或先-80℃長期保存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
KIAA0513蛋白封閉多肽 | 人皰疹病毒通用PCR檢測試劑盒 |
DNA切除修復蛋白1封閉多肽 | 犬輪狀病毒PCR試劑盒 |
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人CD82分子(CD82)試劑盒ELISA | 早期生長反應因子1ELISA試劑盒 |
人超敏C反應蛋白(hs-CRP) ELISA Kit | 肺耐藥蛋白ELISA試劑盒 |
加州立克次體PCR試劑盒 | 復合su1ELISA試劑盒 |
植物總酚(Tp)測試盒 | 土壤銨態(tài)氮微量法檢測試劑盒 |
注意事項:
1、所有步驟均應在超凈工作臺上進行,超凈臺紫外照射至少15min。
2、所有試劑應為此實驗專用。
3、使用75%乙醇或其他去污劑擦拭工作臺,避免表面污染。
4、進入熒光定量PCR 操作實驗室后需要佩戴一次性無菌口罩、無菌乳膠手套、實驗中盡量避免與同事交談,防止PCR 模板污染。
5、實驗中使用各種規(guī)格的離心管,槍頭及配制試劑和溶解沉淀用的水,均應焦碳酸二乙酯(DEPC)處理后使用,以去除吸附的RNA酶污染。
6、使用Trizol試劑時,避免接觸皮膚或衣服。避免吸入蒸氣。
7、qPCR反應需要qPCR級水,試劑和試管。請務必使用正確類型的qPCR光學PCR管和蓋子。不可用普通的PCR管。
8、加樣前,先布局,規(guī)劃加樣順序以避免交叉污染。
9、所有實驗應均應設置無模板對照,其中包含除DNA或cDNA樣品以外的所有反應組分。
10、先配制qPCR反應混合液,減少誤差。
11、加樣后上機前,務必通過瞬離將反應液離至管底,并消除溶液中的氣泡,因為氣泡會干擾熒光檢測且降低酶活性,從而降低擴增效率。